Laboratorio De Lipidos

INSTITUTO SUPERIOR DEL PROFESORADODE SALTA N° 6005
QUIMICA BIOLOGICA 04/10/2012
INFORME DE LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS
OBJETIVO:
* Identificar a través de pruebas bioquímicas los lípidos en las muestras problema.
* Brindar al alumno los reconocimientos básicos paradesarrollar análisis en grasas y aceites.
FUNDAMENTO TEORICO:
Saponificación: las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En losseres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicas (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.
Tinción: los lípidos se colorean selectivamente de rojo – anaranjado con el colorante Sudan III.
Solubilidad: los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando unaemulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.
MATERIALES Y REACTIVOS:
* Muestra: tinta china roja, aceite de oliva.
* Material de vidrio:tubos de ensayo, gradilla, varillas, mechero, cocina eléctrica, rejilla de asbesto por cocina, vasos de precipitado de 150 – 250 ml, pipetas.
* Reactivos: solución de NaOH al 20 %, solución de Sudan III, éter, cloroforma o acetona.
PROCEDIMIENTO:
Saponificación:
1- Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de aceite y 2 ml de NaOH al 20%
2- Agitar enérgicamente y colocar el tubo a bañoMaria de 20 a 30 minutos.
3- Pasado este tiempo, registrar resultados.
Tinción:
1- Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo colocando en ambos 2 ml de aceite.
2- Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudan III.
3- Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.
4- Agitar ambos tubos y dejar reposar.
5- Observar los resultados obtenidos.Solubilidad:
1- Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.
2- Añadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro de éter u otro disolvente orgánico.
3- Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
4- Observar los resultados.
CONCLUSIONES:
En la primer experiencia de saponificación, luego de haber realizado el procedimiento correspondiente, se pudo observar que el tubo que conteníaaceite e hidróxido se había separado en tres fases una inferior clara que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite inalterado.


En la segunda experiencia de tinción se pudo observar que el tubo que contenía la SUDAN III todo el aceite apareció teñido de rojo, mientrasque el tubo que tenía tinta roja en un primer momento al agitar se veía teñido pero luego de reposar la tinta se fue hacia el fondo del tubo quedando el aceite por encima sin teñir.



En la ultima experiencia realizada sobre reconocimiento de lipidos, la solubilidad, observamos que luego de haber agitado fuertemente los tubos que contenian aceite y el disolventeorganico; aceite y agua se obtuvieron resultados claramente diferentes.
El tubo que contenia agua y aceite quedo separado en dos fases ya que el aceite no se disolvio en agua y debido a su menor densidad (0,925 kg/l) quedó por encima del agua. Mientras que el tubo que contenia aceite y eter se disolvio completamente porque son sustancias semejantes dando como resultado una mezcla homogenea....