Laboratorio De Manejo De Recursos Geneticos
UNAN-LEON
MANEJO DE RECURSOS GENETICOS
TEMA:
BUSQUEDA DE POLIMORFISMO EN EL ADN DE MEGASKEPASMA ERYTROCHLAMYS A TRAVES DE LA TECNICA RAPD
ELABORADO POR:
BR. NORMAN JAVIER VEGA PALACIO.
LIC. EN BIOLOGIA. 08/06/2012.
“A la libertad por la universidad”INTRODUCCION
El ADN es por lo común el constituyente básico de la cromatina (cromosoma) nuclear en las células eucarióticas, pero también existe en pequeña cantidad en las mitocondrias y cloroplastos. En los procariontes forma el nucloide (que a diferencia de los eucariontes no va asociado a proteínas, es desnudo) y en los virus (DNA virus) que lo poseen constituyen el virión o elementoinfestante. Por lo común su estructura tridimensional posee giro hacia la derecha (ß-ADN, dextrógiro) que es la forma más estable y ocasionalmente posee giro hacia la izquierda (z-ADN, levógiro) Acorde a las evidencias, sólo una pequeña parte del ADN constituye genes (menos del 10 %). (ADN, ácido desoxirribonucleico.http://www.monografias.com/trabajos12/desox/desox.shtml#intro)
El origen de lavariabilidad genética, esta basada en los distintos mecanismos de la dinámica del ADN (el material genético es dinámico, cambia lenta pero continuamente). La herencia constituye un proceso conservativo, no perfecto por que ocurren errores en el proceso replicativo, es decir, el origen de la variabilidad ocurre porque se transgrede la transmisión hereditaria.
En esta investigación se trabajo con laespecie Megaskepasma erythrochlamys Lindau Bull. Herb. Boissier 5:666 (1897), pertenece a la familia Acanthaceae y su nombre común es manto rojo o pavon, es un arbusto siempre verde de 2-3 m de altura, con las ramitas angulosas escasamente pubérulas. Hojas elíptico-oblongadas, peciolo de 2-4 cm de largo, puberulento, inflorescencias en espigas terminales solitarias, de 15-20 cm de longitud, sobrepedúnculos puberulentos de 2-5 cm de largo. Los frutos aunque rara vez los produce en cultivos, son capsulas claviformes de 3-5 cm de largo, glabras, conteniendo 4 semillas discoides de unos 6mm de diámetro.
Distribución: especie endémica de Venezuela y actualmente cultivad en todos los trópicos y subtropicos.
Usos: planta que requiere climas con temperaturas mínimas de 15°C y humedad ambiental alta,con una exposición soleada o a media sombra y suelos medianamente fértiles y bien drenados. Requiere podas de crecimiento. Se multiplica por semillas y por esquejes.
OBJETIVOS
• Reconocer los pasos básicos de un protocolo de extracción de ADN.
• Obtener ADN de alto peso molecular
• Determinar la calidad y cantidad del ADN vegetal por electroforesis y espectrofotometría.
• Determinarpolimorfismo entre individuos de diferentes especies traídas por estudiantes a través de la técnica RAPD.
• Detectar y separar los fragmentos amplificados por la técnica RAPD para su interpretación y análisis.
MARCO TEORICO
La amplificación aleatoria de ADN polimórfico, más conocida por el acrónimo inglés RAPDs (Random Amplification of Polymorphic DNA), es un tipo de marcador molecular basado enla reacción en cadena de la polimerasa. Los fragmentos de ADN obtenidos por medio de esta técnica se amplifican en regiones aleatorias del genoma ya que los iniciadores o cebadores de la reacción son secuencias arbitrarias de ADN sintético. Es una de las técnicas más versátiles desde que se desarrolló en el año 1990. Es muy cómoda, rápida, requiere poco ADN que además no necesita estar muy puro,no presupone conocimientos previos sobre la secuencia, y se pueden distinguir rápida y simultáneamente muchos organismos. Sus inconvenientes son que los fragmentos amplificados no suelen corresponder a ADN ligado a algún carácter, sino redundante, y que no da información sobre el número de copias que el ADN genómico contiene de la secuencia amplificada. Esta tecnología ha sido utilizada para...
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