Laboratorio De Proteinas

Objetivo Principal
* Conocer la utilidad de la medición de proteínas en un individuo y asociar los resultados al estado de salud del paciente.
Objetivos Específicos

* Realizar la medición de las proteínas totales y la albúmina en una muestra de sangre
* Revisar las diferentes técnicas para identificación y cuantificación de las proteínas.
* Discutir la importancia clínica de laestas determinaciones y sus aplicaciones.

Resultados:

1. Proteínas

Para el análisis de proteínas totales de las muestras de sangre-suero de dos pacientes de la clínica Colombia, Elena Moreno Jiménez y Cipriano Castro Caballero.

Utilizamos cuatro tubos de muestra en los cuales agregamos un reactivo (reactivo de biuter), ya que este por medio los iones de cobre detectan la presenciade proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o mas enlaces peptídicos.
Enumeramos los tubos de ensayo en un orden de 1 a 4, en el cual el tubo 1 lo llamamos tubo blanco, que solo contenía reactivo (1000μl), el tubo 2 llamado patrón, contenía reactivo (1000μl), y 20μl de patrón con una concentración de [63,5 g/L], el tubo 3 era el tubo de muestra de la paciente Elena Moreno Jiménez,el cual contenía reactivo (1000μl) y 20μl de suero, y el tubo 4 era el tubo de muestra del paciente Cipriano Castro Caballero, el cual contenía reactivo (1000μl), y 20μl de suero.

Para añadir estas sustancias en los tubos de ensayo, utilizamos pipetas automáticas, de 40, 50μl y 1000μl. Después de tener las sustancias en los tubos, las mezclábamos, observando un cambio de color producto de lareacción de estas, tomando un color violeta. Seguido a esto incubamos por 10 minutos a una temperatura ambiente, para luego pasar a leer la absorbancia de estas en el espectrofotómetro utilizando la técnica de colorimetría.

1 2 3 4
BLANCO PATRON MUESTRA MUESTRA

1 2 3 4
BLANCO PATRONMUESTRA MUESTRA

Reactivo 1000μl
Reactivo 1000μl
20μl de suero
20μl de suero
Reactivo 1000μl
Reactivo 1000μl

Reactivo 1000μl
Reactivo 1000μl

20μl de suero
20μl de suero
20μl de patrón [63,5 g/L]
20μl de patrón [63,5 g/L]

Reactivo 1000μl
Reactivo 1000μl

Al pasar los 10 minutos, pasamos a leer la absorbancia de las sustancias en el espectrofotómetro.
Cada tubolo pasábamos por el Vortex, para asegurarnos de que las sustancias estuvieran bien revueltas. Luego pasábamos cada tubo al espectrofotómetro, metiendo la manguera capilar hasta el fondo del tubo para que hiciera contacto con el liquido y activamos el equipo sosteniendo aquí el tubo hasta que un botón rojo nos indicaba que ya estaba listo el resultado de la absorbancia, sacábamos el tuboanotábamos los resultados y así realizamos el mismo procedimiento con los cuatro tubos de ensayo

VORTEX

Imagen tomada de:
http://img.directindustry.es/images_di/photo-g/agitador-shaker-tipo-vortex-de-laboratorio-63431-2801611.jpg

ESPECTROFOTOMETRO
Manguera capilar
Manguera capilar

Imagen tomada: http://www.gisiberica.com/espectrofotometros/EF009.htm
Los resultados obtenidos fueron lossiguientes:
ABSORBANCIA PROTEINAS
TUBO 1 | O.103 |
TUBO 2 | 0,423 |
TUBO 3 | 0,438 |
TUBO 4 | 0,405 |

Luego de obtener los resultados, realizamos los cálculos matemáticos con base a la siguiente formula:
A muestra x C patrón = [ g / l ]
A patrón
Valores de referencia:
Recién nacidos: 4.6 a 7.0 g / dl o 46 a a70 g/l
Niñosde 3 años y adultos: 6.6 a 8.7 g/ dl o 66 a 87 g /l

* TUBO 1

X = 0,103 X 63,5 g/L = 15,4 g/L --- 1,54 g/μl
0,423

* TUBO 2

X= 0,423 X 63,5 g/L = 63,5 g/L --- 6,35 g/μl
0,423

* TUBO 3 (HELENA MORENO JIMENEZ)

X= O.438 X 63, 5 g/L= 65, 7 g/L --- 6, 57 g/ μl
0.423

* TUBO 4 (CIPRIANO CASTRO CABALLERO)

X= 0,405 X 63, 5...