Laboratorio Enterobacterias

Identificación de Cocos y Cocobacilos Gram negativos pertenecientes a las Enterobacterias
Pontificia Universidad Javeriana
Martinez, Andres Felipe

Resumen
Las enterobacterias como su nombre lo indica son aquellas bacterias que son encontradas dentro de la flora del tracto gastrointestinal tanto humano como animal, dentro de todas las bacterias que se encuentran en este lugar analizaremos losmétodos de identificación bioquímica para los microorganismos clasificados como Bacilos Gram negativos y Cocobacilos Gram negativos, con el fin de identificar el género y especie de un microorganismo nombrado con el número 3, también se expondrá por qué se elige el género Klebsiella como resultado de la identificación a partir de las pruebas bioquímicas realizadas .
Palabras Clave: Bacilos Gramnegativos, Coco-Bacilos, Identificación, Enterobacterias, Pruebas bioquímicas.
Materiales y métodos
Para la identificación del microorganismo primero se realiza una tinción de Gram para saber con qué tipo de microorganismo se está trabajando, luego es sembrado en diferentes medios de cultivo y batería de pruebas bioquímicas, los cuales consisten en los siguientes medios de cultivo:
AgarMacConkey: Este medio de cultivo es selectivo para bacterias Gram negativas debido a que posee sales biliares y cristal violeta que inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas, además evalúa la capacidad del microorganismo de usar la lactosa como fuente de carbono a partir de la producción de ácidos, lo cual se identifica con el color rojo u rosa de las colonias para aquellas bacterias capaces deproducir ácidos.
Agar TSI: Este medio de cultivo es utilizado para determinar la capacidad fermentativa de lactosa, sacarosa y glucosa, además evalúa la producción de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio. Si se llegase a producir ácido sulfhídrico este se combina con los iones Fe3+ aportados por el sulfato de hierro y amonio dando como resultado una coloración negra. Con respecto a lalectura de la capacidad fermentativa del microorganismo esta se hace por medio de la alcalinidad(Color rojo)y la acidez(Color amarillo) del medio donde se pueden obtener los siguientes resultados:
Pico alcalino/fondo ácido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa. (K/A)
Pico ácido/fondo ácido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa,lactosa y/o sacarosa. (A/A)
Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azúcares. (K/K)
En este medio de cultivo también es posible observar la producción de gas por medio de la ruptura del medio o la presencia de burbujas
Agar Rambach: Es un medio selectivo para Salmonela sp donde sus colonias toman un color rojo, para las demás enterobacterias lascolonias toman un color azul o violeta, debido a las sustancias cromógenas que presenta el medio (1)
Agar Fenilalanina: Evalúa la capacidad del microorganismo de des-aminisar la fenilalanina para producir ácido fenilpirúvico ,para poder interpretar los resultados de esta prueba se debe adicionar Cloruro férrico al 10% ,donde el resultado es positivo cuando se obtiene una coloración verde
Agar LIA:Evalúa la capacidad del microorganismo de descarboxilar o aminacion la lisina y producir ácido sulfúrico, para su lectura se torna violeta cuando hay descarboxilación de la lisina, si se torna rojo en el fondo indica la desaminisacion, es negativo cuando se torna amarillo por la acidificación del medio
Agar Urea: Determina la capacidad del microorganismo de hidrolizar urea por la acción de laenzima ureasa, es positivo cuando el medio se torna completamente rosa, aunque si el pico del medio se torna rosa y el fondo no cambia de color se asume que la capacidad de hidrolizar es débil
Agar TSA: Este medio de cultivo favorece el crecimiento y desarrollo bacteriano ya que posee tripteina y peptona de soya, se utiliza como base para el agar chocolate.
Agar Citrato: Evalúa la capacidad del...