Laboratorio Genetica

Extracción de ADN vegetal

MATERIALES:

* Vegetal Fresco
* Tubos de Ensayo
* Mortero
* Pipetas
* Probetas
* 10 ml de Alcohol 95%
* 10 ml Solución Tampón
* 1ml de Jugo Enzimático
* 5 ml de Solución Salina 4%
* 2 gotas Azul de Metileno

PROCEDIMIENTO

1. Colocar un pedazo de aproximadamente una pulgada de vegetal agregando 10 ml de solución tampón(necesaria para romper la pared) y membranas celulares en un mortero, y macerar.




2. Decantar aproximadamente 10 ml del líquido del mortero dentro de un tubo para centrifugar.

3. Centrifugar por 7 minutos a 2500 RPM, para lograr la separación en dos fases los componentes de la mezcla.

4. Decantar elsobrenadante del tubo para centrifugar en un tubo de ensayo limpio. Agregar 1ml de jugo enzimático, necesario para desnaturalizar las proteínas.


5. Mezclar por inversión 10 veces.

6. Cuidadosamente (dejando resbalar por las paredes del tubo de ensayo) agregar 10ml de Etanol 95% frio, luego deje reposar por 5 minutos, para lograr precipitar el ADN en la interfase.7. Extraer de la interfase y trasladar las fibras de cromatina a la solución salina al 4% previamente colocada en tubo de ensayo limpio, contribuyendo a la preservación del ADN.

8. Teñir las fibras de cromatina con 1 gota de azul de metileno, lo cual permitirá tener una mejor visualización del ADN.Extracción de ADN animal

MATERIALES

* Trozo de hígado de pollo
* Mortero
* Centrifugadora
* Tubos de ensayo
* Pipeta
* 1 cucharada de arena lavada
* 20 ml de agua destilada
* 5 ml de solución salina 4%
* 10 ml de Alcohol etílico de 96%
* 10 ml deCloruro sódico 2M
* 1 ml de SDS (dodecil sulfato sódico) o detergente
* 2 Gotas de Azul de Metileno.
PROCEDIMIENTO

1. Colocar un pedazo de hígado de pollo de una pulgada, agregar una cucharada de arena y 20 ml de agua destilada en un mortero y macerar, para romper la membrana celular.2. Agregar a la mezcla del mortero 10 ml de NaCl 2M. Depositar 10 ml de la mezcla en un tubo de ensayo para centrifugar, logrando la ruptura de los núcleos de la célula.


3. Centrifugar por 7 minutos a 2500 RPM para lograr laseparación en 2 fases de los componentes de la mezcla.

4. Decantar el sobrenadante del tubo para centrifugar en un tubo de ensayo limpio. Agregar 1 ml de detergente, necesario para desnaturalizar las proteínas.

5. Mezclar por inversión 10 veces.

6. Cuidadosamente (dejando resbalar por las paredes del tubo de ensayo) agregar 10 ml de Etanol 96% frio, luego dejar reposar 5 mins para dejarprecipitar el ADN.

7. Extraer el ADN de la fase que presenta la mayor condensación y trasladar las fibras de cromatina a la solución salina al 4% previamente colocada en un tubo de ensayo limpio.




8. Teñir las fibras de cromatina con 1 gota de azul de metileno

CUESTIONARIO
1. Sintetice en un máximo de 10 renglones,que es ADN, su estructura y como esta formado y cual es la importancia en su estudio de la genética humana.
El ADN es el ácido desoxirribonucleico. Se encuentra en los núcleos de las células, que componen el cuerpo. En consecuencia, el ADN puede considerarse como uno de los pilares del cuerpo. ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el material hereditario que se encuentra en el núcleo de todas las...