Laboratorio higado de pollo

Base Teórica
La biología molecular surge alrededor de los 1930’s. Se centra en entender la interacción y regulación entre ADN, ARN y proteínas. Mediante esta podemos acercarnos a los entendimientos de procesos biológicos que ocurren a larga escala, estudiándolos a nivel molecular. La misma une conceptos del área de biología cono genético, químico y bioquímica, entre otros. La microbiologíamolecular nos permite entender los principios moleculares de los procesos fisiológico de la célula procariota y eucariota. Además, nos ayuda en la caracterización de bacterias desconocida aisladas y de comunidades microbianas.
Este laboratorio se centra principalmente en la extracción de ADN genómico de una célula eucariota. El ADN genómico se refiere a todo el ADN presente en la célula de unorganismo. Para llevar a cabo la extracción del ADN genómico utilizaremos técnicas moleculares, las cuales se pueden utilizar para caracterizar, aislar y manipular componentes celulares. Algunos ejemplos de estas técnicas moleculares son: Reacción en cadena de polimerasa (PCR), Clonación, Geles de electroforesis y Southern Blot.
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que losiones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otrassustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol.
Objetivos:
1. Extraer el ADN de un tejido animal, y por el aspecto que presenta, confirmar su estructurafibrilar.
El objetivo anterior si se ha cumplido, ya que el proceso de trabajo ha sido ordenado y con precisión para así mismo poder obtener la visión del ADN y observar su estructura fibrilar.
2. Practicar el valor del respeto y la solidaridad durante la práctica de laboratorio.
Este último objetivo está orientado a ser el principal para realizar con exactitud la práctica de laboratorio, pues alactuar de forma responsable ya sea trayendo los materiales pedidos, participando en el proceso de obtención de ADN y elaboración de informe muestra el interés y responsabilidad de los alumnos.

Materiales

Material de Laboratorio | Material de Estudio |
* Mortero con la mano * Alcohol 90% * Sal de Cocina * Azul de metileno * Agitador de Vidrio * Vaso de precipitados (2)* Pipeta * Probeta * Microscopio * Portaobjetos * Arena Fina * Tela para filtrar | * Detergente Casero * Hígado de Pollo |
Procedimiento:
* Triturar medio hígado de pollo en un mortero. Agregar un poco de arena fina y triturar para romper las membranas del citoplasma y liberar los núcleos.
Agregar al triturado 50 ml de agua. Remover hasta hacer una especie de puré.Observaciones: Se debió agregar la cantidad suficiente de hígado de pollo para empezar a triturar, agregando agua destilada y se regulaba de acuerdo a la cantidad de puré formado del hígado de pollo.
* Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado sin romper.
Observaciones: Se debió realizar como mínimo dos filtraciones de la mezcla ya que todavía estabanpresentes restos
* Medir el volumen del filtrado con una probeta.
* Verter el filtrado en un vaso de precipitados y agregar un volumen igual de solución concentrada de sal de cocina. Esto hará estallar los núcleos para liberar las fibras de cromatina.
* Agregar 1 ml de detergente casero para formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN.
* Con una pipeta agregar 50 ml...