laboratorio Microbiologia Analitica

República Bolivariana de Venezuela
Universidad Central de Venezuela
Facultad de Farmacia
Mención Control de Calidad de los Medicamentos
Laboratorio de Microbiología Analítica














Profs: Valentina Fernández
Dunia Pérez
Alessandra Garcés

Bustamante Natalia C.I: 17123576Caracas, 8 de agosto de 2014.
Ensayos
Evaluación de la Efectividad de los Preservativos
Rapidez de Muerte
Diluciones de Uso
Suspensión Cuantitativa
Diluciones seriadas en medio liquido (Diluciones de Kolmer)
Difusión en Agar
Difusión en placas de Agar (Burlingame-Reddish)
Método de Golden-Oster (Compuestos solubles en alcohol y Cremas y Ungüentos)

Evaluación de la Efectividad de losPreservativos
Fundamento: Contaminar una muestra de un producto terminado que contiene el agente preservativo, con un microorganismo de ensayo, para evaluar a diferentes tiempos de contacto, el numero de microorganismos viables en la muestra.
Características de la Muestra: utilizada por equipo 2 y 4
Producto: Refluxyl® (0,400g-0,375g/15mL bicarbonato de sodio-alginato de sodio)
Fabricante: ZuozLote: 1310002
Contenido Neto: 360mL
Fecha Elab: 10/13 Fecha Exp.: 10/15
Envase: Frasco de Polietileno de alta densidad, color blanco, con tapa de rosca, sellada con un precinto de seguridad. Etiqueta impresa en el envase, rotulados en rojo, azul y negro
Contenido: Suspensión homogénea, transparente, con ligero olor a menta, presencia de burbujas por agitación.
Categoría: 4, Antiácidospreparados con base acuosa. El producto debe ser inoculado con 103- 104 ufc/ml, alrededor de 5,5 x 103 ufc/ml.

Microorganismo(s) de ensayo(s): Escherichia coli ATCC10536 13/06/14 y Candida albicans ATCC 10231
Para 360 ml de contenido de la muestra, el volumen de suspensión del microorganismo a inocular debe ser de 3,6 ml, equivalente al 1% del volumen de la muestra.
1 ml muestra _____ 5,5 x 103 ufc3,6 ml susp estnd mo _______ 1,9 x 106 ufc
360 ml muestra ____ x = 1,9 x 106 ufc 1 ml susp estnd mo _______ x = 5,3 x 105 ufc

Concentración deseada de la suspensión del microorganismo = 5,3 x 105 ufc/ml
Concentración resultante de la estandarización del microorganismo E. coli ATCC 10536
= 5,9 x 1010 ufc/ml

Fd = Concentración inicial Fd = 5,9 x 1010 ufc/ml = 111320,7 (teórico)Concentración final 5,3 x 105 ufc/ml

1 ml susp conc______ 5,9 x 1010 ufc 50 ml _______ 2,65 x 1010 ufc
0,45 ml susp conc_____ x = 2,65 x 1010 ufc 0,45 ml ______ x = 2,39 x 108 ufc
Fd =2.226 fd = 110.879

50 ml _______ 2,39 x 108 ufc 25 ml ______ 1,19 x 107 ufc
2,5 ml ______ x = 1,19 x 107 ufc 1 ml _____ x = 4,8 x 105 ufc ≈ 5,3 x105 ufc
Fd = 20.084 fd = 24.792

Fd total =2,226 x 110,879 x 20,084 x 24,792= 122.895,57 (real)
Concentración final = Concentración inicial = 5,9 x 1010 ufc/ml = 4,8 x 105 ufc/ml
Fd 122.994,26

0,45 ml susp conc 50 ml
(2,65 x 1010 ufc)

0,45 ml 50 ml
(2,39 x 108 ufc)

2,5 ml25 ml ≈ 4,8 x 105 ufc/ml
(1,19 x 107 ufc) Dilución final Susp estandarizada

1 ml Susp estandarizada (4,8 x 105 ufc)
360 ml muestra
1,3 x 103 ufc/ml (103- 104 ufc/ml)


Resultados: Expresados en unidades formadoras de colonia/ml (ufc/ml)Microorganismo
Tiempo
Diluciones


10-1
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
E.coli
ATCC 10536
13/06/14
Equipo 2
0
3,4x102
> 102
> 103
> 104
> 105
> 106
> 107

7
> 101
> 102
> 103
> 104
> 105
> 106
> 107

14
> 101
> 102
> 103
> 104
> 105
> 106
> 107

28
> 101
> 102
> 103
> 104
> 105
> 106
> 107
C. albicans
ATCC 10231
Equipo 4
0
> 101
2,5x103
3x103...