LABORATORIO N8

LABORATORIO N°8
“ESPECTROFOTOMETRÍA”
1) RESUMEN:
El trabajo práctico consiste en la determinación de la concentración de una disolución (muestra problema) en base, principalmente, a la aplicación de la ley de Lambert-Beer.
Para ello se dispone de una disolución stock de azorrubina de concentración molar, de la cual se preparan 5 disoluciones con alícuotas de 5, 10, 15 ,20 y 25mL cada unadisuelta en un matraz aforado de 50mL.
De estas, la disolución compuesta por 15mL de azorrubina, se lleva al espectrofotómetro, junto a una disolución blanco de agua destilada.
Se realiza un barrido que va desde los 450 hasta los 650nm para así poder determinar la longitud de onda donde la absorbancia es máxima, y es a este valor al cual se debe medir la absorbancia de las demás muestras para luegograficar, calcular y determinar la concentración de la muestra, es decir, su ubicación en el eje de las abscisas en base al conocimiento del valor del eje de las ordenadas.

2) INTRODUCCIÓN:
La luz es una radiación electromagnética que presenta comportamiento dual, es decir, tiene un aspecto ondulatorio ya que se propaga en forma de onda, y un aspecto corpuscular el cual se pone de manifiesto alestar en contacto con la materia [3].
La luz puede ser absorbida y transmitida al tener contacto con la materia, y la forma de cuantificar este fenómeno se hace mediante la realización de un espectro de absorción.
El espectro de absorción de determinado compuesto está condicionado tanto por sus propiedades físicas, que nos permiten realizar análisis cualitativos, y su concentración en determinadadisolución, que ayuda a generar un análisis cuantitativo [1].
Existen dos tipos de espectros de absorción, uno es la absorción a nivel atómico, y se da por las transiciones electrónicas en los niveles energéticos del átomo, el cual solo logra absorber pequeñas longitudes de onda, y el otro es el espectro de absorción molecular, que es a un nivel ya macro (el cual es analizado en el presentedocumento).
El instrumento de uso por excelencia para medir esta capacidad en moléculas, se denomina “espectrofotómetro”, el cual hace incidir luz monocromática en una serie muestras junto a una muestra denominada “blanco” que ayuda a ajustar el instrumento, ya que cabe mencionar, la absorbancia es aditiva, y de no existir un blanco que reste esta adición, habría fallas de datos y los resultados no seríanfidedignos [1].
A medida que incide luz en la serie de muestras, la intensidad lumínica disminuye, debido a que estas absorben cierta cantidad de luz y la que no logra absorber, la transmiten.
Biológicamente hablando, los colores de los objetos, pigmentos, sustancias, etc. Se debe a que la luz transmitida llega al ojo, pasa la córnea hasta llegar al cristalino, que enfoca estos haces de luz y sedirige a la retina que manda señales eléctricas al cerebro que producen la formación de la imagen con su respectivo color.
Sin embargo, como se planteó en un principio, la capacidad de absorbancia está condicionada por las propiedades de la muestra, y una de estas que es de suma importancia en las disoluciones, es su concentración, es decir a medida aumente o disminuya la presencia de soluto en undisolvente, la absorbancia variará de forma lineal, y es mediante este razonamiento por el cual se pretende calcular la concentración de una muestra problema con el mero conocimiento de su absorbancia.

2.1) HIPÓTESIS:
A medida que aumenta la concentración, se puede suponer que aumenta la absorbancia de la muestra.
Analizando las muestras de forma visual, se puede inferir que a medida que ladisolución presente un color más intenso, se deba a que su transmitancia es mayor que su absorbancia

2.2) OBJETIVOS:
Generales:
-Adquirir familiaridad con la preparación de “disolución stock” y “diluciones en serie”.
Específicos:
-Preparar y construir una curva de calibración.
-Determinar la concentración de una disolución de concentración desconocida, en base a la ley de Lambert-Beer.
3) PARTE...