laboratorio replicacion

Laboratorio en Seco: Replicación.

Marco teórico:
La replicación es un proceso mediante el cual se obtienen 2 hebras de ADN replicadas a partir del ADN molde. Este es un proceso semiconservativo ya que cada célula hija conserva una cadena molde y la otra es sintetizada nueva; es bidireccional porque el comienza en puntos determinados y avanza hacia ambos lados hasta los puntos de terminación;antiparalela y semidiscontinua porque existe una hebra líder y una retardada.
En este proceso intervienen diferentes enzimas de principio a fin. Algunas de ellas son: helicasa la cual rompe los puentes de hidrogeno entre los nucleótidos del ADN molde para poder abrirlo. La primasa que sintetiza pequeños fragmentos de ARN para que la ADN polimerasa pueda partir sintetizando o la ADN ligasa queune los fragmentos de okazaki de la hebra complementaria.
La ADN polimerasa es la encargada de unir los nucleótidos complementarios a los de la hebra líder, tanto en procarionte como en eucarionte, también es la que chequea que no exista algún error una vez terminado el proceso, ya que esto podría causar mutaciones. Pero para que esta enzima pueda cumplir su función, se deberán cumplir algunosrequerimientos: primero la ADN polimerasa siempre lee la cadena molde en sentido de 3’ a 5’por lo tanto sintetiza la nueva cadena en sentido 5’ a 3’; esta es la razón de por qué no se puede sintetizar de forma continua la hebra que van en sentido de 5’ a 3’, sino que se tiene que sintetizar en pequeños fragmentos de nucleótidos llamados fragmentos de Okazaki. Y segundo, no puede partir uniendonucleótidos sin tener antes un corto fragmento de ARN llamado primer o cebador, el cual es sintetizado por la primasa. Es por esto que en este laboratorio veremos qué sucedería si se inhibe la primasa.

Objetivo:
Investigar qué sucedería al quitar una enzima (Primasa) en el proceso de replicación.

Variables:
Variable independiente: Primasa.
Variable dependiente: Proceso de Replicación.Variable controlada: el resto de las enzimas que actúan, tales como helicasa, girasa, topoisomerasa, proteínas SSB y ADN ligasa. Nucleótidos necesarios para el proceso, la energía en forma de ATP, entre otros.
Hipótesis:
Si la Primasa no sintetiza el primer o cebador, que es aquel primer fragmento de ARN que permite que la ADN polimerasa comience sintetizando, entonces no se va a poder producir launión de nucleótidos complementarios a la hebra molde, con lo que se vería afectado el proceso de replicación del ADN ya que esto afectaría la función de otra enzima, ADN polimerasa y así alteraría todo el proceso restante.

Análisis:
En el proceso de replicación antes de comenzar sintetizando las nuevas hebras de ADN, se debe abrir la hebra molde, esto se lleva a cabo con la ayuda de distintasenzimas. Esta primera parte si se podría realizar sin la Primasa ya que todavía no se utiliza el primer. El proceso que no se podría realizar es el que viene después, la unión de bases complementarias para formar ADN.
La enzima llamada Primasa es la encargada de sintetizar el primer dentro del proceso de replicación, esto lo hace para que la ADN polimerasa III, en el caso de las procarionte; a(hebra retardada) y d (hebra líder) en el caso de las eucarionte, pueda actuar ya que uno de los problemas que esta última debe enfrentar es no poder iniciar la síntesis sin un corto fragmento de ARN (primer). Con la ausencia del cebador, la ADN polimerasa no podría actuar y por lo tanto no se podría realizar la unión de bases complementarias. Otras de las enzimas que no podrían realizar su funciónson la ADN polimerasa I y II en células procarionte y las ADN polimerasas b, e y g en células eucarionte.
Al interrumpir o alterar algo, sin importar lo mínimo que sea en un proceso, esto siempre traerá repercusiones en las etapas posteriores del ciclo, ya que si se utilizan es por algo. En este caso, al sacar la Primasa alteraría la parte del proceso posterior tanto en la hebra líder como en...