Laboratorio N 5 Bioligia

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS
UNILLANOS
LABORATORIO DE BIOLOGÍA
PRACTICA N° 5
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA




LIC. DOLLY GALLEGO


CRESPO CABRERA ALSELMO
Código: 111003506

JESSICA CIRO VERGARA
Código: 111003411



27/03/2015


INTRODUCCION


El término cinética enzimática implica el estudio de la velocidad de una reacción catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener factores comolos inhibidores. Uno de los principales estudios que se realizan en una enzima es medir el efecto en la velocidad de la reacción cuando se modifican las concentraciones del sustrato y se mantienen constantes la concentración de enzima, el pH, la fuerza iónica del medio, la temperatura, entre otros.


Se evalúa la influencia de estos factores en la reacción catalizada por enzimas con la finalidad dedeterminar los intermediarios en una reacción y el papel que juegan en la reacción enzimática, es decir, para predecir mecanismos de reacción. Es esencial entender estos mecanismos para desarrollar nuevas herramientas moleculares, por ejemplo, para combatir enfermedades en las que se conoce a la enzima que la produce. También es usual medir la actividad enzimática con diferentes sustratos paraentender su especificidad o bien, medir la actividad de la enzima de diferentes tejidos u organismos para entender cómo las diferencias en actividad están relacionadas con la función y/o la fisiología del organismo del que proceden.








OBJETIVOS



Comprobar la reacción sobre el peróxido de hidrógeno por acción de la enzima catalasa.




Estudiar algunos factores que afectan la actividadenzimática, como la temperatura, el pH, la concentración del sustrato y de la enzima y la presencia de inhibidores.




Confrontar los conocimientos teóricos adquiridos en clases con las actividades experimentales en el laboratorio.












MATERIALES Y REACTIVOS




Tubos de ensayo
Vasos de precipitado de 250 ml
Agitadores
 Ácido clorhídrico o sulfúrico
 Hidróxido de sodio (NaOH)
 Mortero ymango
 Papa cruda
 Hielo
 Pipeta de 5 ML
 Cajas de Petri
 Cloruro de mercurio (metal pesado)
 Nitrato de palta o de plomo al 1%
 Dióxido de manganeso (catalizador inorgánico)
 Peróxido de hidrógeno






MARCO TEORICO

Los enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las reacciones químicas que tienen lugar en la célula. Son muy eficaces como catalizadores ya que soncapaces de aumentar la velocidad de las reacciones químicas mucho más que cualquier catalizador artificial conocido, y además son altamente específicos ya que cada uno de ellos induce la transformación de un sólo tipo de sustancia y no de otras que se puedan encontrar en el medio de reacción.

FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Diferentes factores ambientales pueden afectar a la actividadenzimática. Destacaremos dos:
El pH y la temperatura.

EFECTO DEL pH:
El pH es otro factor que influye en la actividad enzimática, debido a que el pH influye en la ionización de los grupos funcionales de los aminoácidos que forman la proteína enzimática. Cada enzima realiza su acción dentro de un determinado intervalo de pH, dentro de este intervalo habrá un pH óptimo donde la actividad enzimáticaserá máxima. Por debajo del pH mínimo o por encima del pH máximo el enzima se inactiva ya que se desnaturaliza. En la mayoría de las enzimas el pH óptimo está próximo a la neutralidad, aunque hay excepciones. La mayoría de los enzimas presentan un pH óptimo para el cual su actividad es máxima; por encima o por debajo de ese pH la actividad disminuye bruscamente. Este efecto se debe a que, al serlos enzimas de naturaleza proteica, al igual que otras proteínas, se desnaturalizan y pierden su actividad si el pH varía más allá de unos límites estrechos. De ahí la conocida importancia biológica de los sistemas tampón

En la mayor parte de los casos el pH óptimo está próximo a la neutralidad, en consonancia con el pH intracelular, pero existen enzimas con pH óptimo muy diverso según sea el...