laboratorio

Universidad de Concepción, Campus Los Ángeles
Carrera: Pedagogía en Ciencias Naturales y Biología
Asignatura: Biología Celular y Molecular

Laboratorio N°2. “REPRODUCCIÓN IN VITRO DE ERIZO DE MAR”
I. OBJETIVOS:
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Realización de una fecundación in vitro.
Conocer el desarrollo embrionario del erizo de mar.

Uno de los aspectos más importantes de los seres vivos es su capacidad dereproducirse. Es así
como las especies pueden mantenerse a lo largo del tiempo. ¿Te imaginas como se reproduce un
erizo de mar? ¿Has hecho alguna vez fecundación in vitro? ¿Sabes que es una larva? Te
invitamos a explorar y conocer diferentes aspectos de la reproducción en un organismo marino.
INTRODUCCIÓN
El trabajo lo realizaremos en grupos de no más de cuatro personas. Observa cuidadosamentelas
preparaciones al microscopio. Registra todo lo que haces y todas las observaciones que te
parezcan importantes. Debes trabajar en forma rápida y ordenada, porque esta actividad demora
alrededor de 2 horas en su preparación. Recuerda que estás trabajando con organismos vivos por
lo que debes tener cuidado al manipularlos.
Se trabajara con el erizo negro (Tetrapygus niger). Este organismomarino es muy utilizado en
estudios reproductivos ya que es fácil obtener sus gametos y lograr la fecundación.
Ejercicio N°1: El erizo de mar y su morfología:
El objetivo de esta actividad es que logres diferenciar las partes de un erizo. El erizo de mar es un
organismo “dioco”, es decir, los sexos masculino y femenino se presentan en Individuos separados.
Sin embargo a simple vista esimposible distinguir uno de otro. El cuerpo de un erizo de mar se
divide en dos partes: una “oral”, que posee la boca y está dirigida hacia el sustrato, y una parte
“aboral” que contiene la región anal.
Con cuidado debes tomar un erizo y reconocer estas dos zonas en el erizo. ¿Son iguales? ¿Qué
diferencias
Ejercicio N°2: Obtención de gametos
El objetivo de esta actividad es que conozcas una técnicapara obtener los gametos en el erizo de
mar.
Necesitas una bandeja, una jeringa, solución de KCl 0.5 M, una cápsula de Petri, un vaso
precipitado de 200 mL y 150 mL de agua de mar. Existen varias técnicas usadas por los científicos
para obtener gametos, la más utilizada en erizos es una denominada “estímulo químico”, y consiste
en aplicar una solución de KCl (cloruro de potasio) al 0,5 M. Conéste método el erizo evacua sus
gametos y no muere.
PRECAUCIÓN. Debes tener cuidado al trabajar con KCl, ya que el uso indebido puede causar
daños a la salud. Debes tomar el erizo e invertirlo (con la zona oral hacia arriba) e inyectarle, 5 mL
de solución KCl 0,5M con una jeringa, tal como aparece en la Figura 1.

Figura 1: Proceso de inducción a la
liberación de gametos en erizo.Inyección
de KCl en la cavidad interna del erizo.

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Carrera: Pedagogía en Ciencias Naturales y Biología
Asignatura: Biología Celular y Molecular
Deberás esperar algunos segundos y observar. ¿Qué sucede?. ¿Porqué crees que pasa esto?.
¿Cómo crees que se induciría la liberación de gametos? si el erizo es macho liberará un líquido de
color blanquecino, encambio si es hembra el líquido será de color rojo.
El erizo macho debe ser colocarlo en una cápsula de Petri sin agua de mar, como aparece en la
Figura 2a, la hembra debes dejarla en un vaso precipitado con agua de mar (Figura 2b).

2A

2B

Figura 2: (a) Erizo masculino inyectado con KCL puesto sobre una cápsula de Petri. (b) Erizo
femenino inyectado con KCl puesto sobre un vaso pp.Ejercicio N°3: Observando los gametos.
El objetivo de esta actividad es que observes y diferencies los gametos masculinos y femeninos del
erizo. Necesitas dos cubreobjetos, dos portaobjetos, una cápsula de Petri y dos pipetas Pasteur.
1.- Toma con una pipeta Pasteur un poco del líquido blanquecino liberado por el erizo macho y
deposita una pequeña gota en la cápsula de Petri, luego agrega 10...