Laboratorios

PRESENTACION
CUAL ES LA NECEDESIDAD DEL ANÁLISIS DE PROTEÍNAS
Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y más diversas. Son imprescindiblespara el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, y conociendo su analisisis podremos saber mas información sobre el comportamiento normal de nuestro organismo.En este trabajo presentamos los diferentes tipos de análisis y espero que sea información útil para su estudio

Métodos de determinación
de proteínas
* MÉTODO DE KJELDAHL
* MÉTODO DE BIURET* MÉTODO DE LOWRY
* MÉTODO DEL ÁCIDO BICINCONÍNICO (BCA)
* MÉTODO DE ABSORCIÓN UV A 280NM
* MÉTODO DE ADHESIÓN DE COLORANTE
* MÉTODO DE BRADFORD
* MÉTODO DE LA NINHIDRINAI. PROCEDIMIENTO PARA EL
MÉTODO DE BIURET
* 5 ml de reactivo de Biuret se mezcla con 1ml de solución proteica (1-10 mg de proteína/ml). El reactivo incluye sulfato de cobre (CuSO4) , NaoH, ytartrato de sodio y potasio el cual se utiliza para estabilizar el ión cobre en la solución alcalina
* Después de reposo a temperatura ambiente durante 15 a 30 minutos, se lee la absorbencia a540nm contra un blanco con sólo reactivo.
* si la reacción no es clara debe centrifugarse la muestra previo a la lectura de la absorbencia

DESVENTAJAS DEL MÉTODO DE
BIURET
* requiere de almenos 2 a 4 mg de proteína por prueba
* las concentraciones altas de sales de amonio interfieren con la reacción
* puede ocurrir opalescencia en la solución final si están presentes altasconcentraciones de lípidos o carbohidratos
II. MÉTODO DE LOWRY
El complejo proteína-Cu2+ se hace reaccionar con el reactivo de Folin-Ciocalteus, dando una coloración azul, con un máximo deabsorción a 650 nm. Esta coloración se atribuye a la reducción del ácido fosfomolíbdico/fosfotúngstico a azul de heteropolimolibdeno de composición no definida, por medio de los residuos tirosilos,...