Laboratorista

Páginas: 24 (5897 palabras) Publicado: 7 de noviembre de 2012
TSI Agar
Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.

Fórmula (en gramos por litro) | Instrucciones |
Extracto de carne  | 3.0 | Suspender 62,5 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien ycalentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolución . total. Llenar hasta la tercera parte delos tubos de ensayo. Esterilizar a. 121 C por 15 minutos. Enfriar en pico de flauta profundo. |
Pluripeptona  | 20.0 | |
Cloruro de sodio  | 5.0 | |
Lactosa  | 10. | |
Sacarosa  | 10.0 | |
Glucosa  | 1.0 | |
Sulfato de hierro y amonio  | 0.2 | |
Tiosulfato de sodio  | 0.2 | |Rojo de fenol  | 0.025 | |
Agar |  13.0 | |
| pH final: 7.3 0.2 | |
Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbonofermentables.El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierroy amonio, es la fuente de ionesFe3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y produce en sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido.El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el quereacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Características del medio
Medio preparado: rojo

Resultados

MIO Medio
Medio usado para la identificación de Entero bacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina de carboxilasa y producción de indol.
Fórmula (en gramos por litro) |Instrucciones |
Dextrosa | 1.0 |
Extracto de levadura  | 3.0 |
Peptona | 10.0 |
Tripteína | 10.0 |
Clorhidrato de L-ornitina  | 5.0 |
Agar | 2.0 |
Púrpura de bromocresol | 0.02 |
pH final: 6.5 0.2 | |
Suspender 31 g del polvo en un litro de agua destilada. Calentara ebullición hasta completa disolución. Distribuir en tubos yesterilizar 15 minutos a 121 C. |



Fundamento
Medio de cultivo semisólido, altamente nutritivo debido a la presencia deextracto de levadura, peptona y tripteína. Además, la tripteína aporta grandes cantidades de triptofano, sustrato de la enzima triptofanasa, para la realización de la prueba del indol. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es élsustratopara la detección de la enzima ornitina decarboxilasa, el púrpura debromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino es de color púrpura y en medio ácido es amarillo.Por su composición, es posible detectar 3 reacciones en un mismo tubo: movilidad, presencia de ornitina de carboxilasa e indol.
Los microorganismos que no producen lisina decarboxilasa, pero que sonfermentadores de la glucosa, producen un virajede la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de incubación se observa el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo amarillo. La producción de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formación de sulfuro de hierro.Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas cepas deMorganella, desaminan la...
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