lactato deshidrogenasa

REACCIÓN DE LA LACTATO DESHIDROGENASA
Nombre sistémico: L-lactato: NAD+ oxidoreductasa
La LDH cataliza la siguiente reacción:
24638007239000Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
En determinadas condiciones de concentraciones y tiempo la cantidad de piruvato transformado en lactato es directamente proporcional a la actividad de LDH.
La enzima no tiene especificidadestricta por el sustrato pues puede actuar sobre otros α-ceto o α-hidroxiácidos estructuralmente similares al pirúvico (por ejemplo sobre el α-cetobutírico). Tampoco es estricta su especificidad por la coenzima, pues puede utilizar también el NADPH, aunque las velocidades de reacción son mucho menores.
A pH 7,3 - 7,8 el equilibrio de la reacción está desplazado hacia el lactato, pero a pH más alcalino(pH 8,5 - 10,0) el equilibrio se desplaza hacia el piruvato; entonces, la reacción puede ocurrir en cualquiera de los dos sentidos, dependiendo del pH y de la concentración de los sustratos que se encuentren presentes.
La LDH es una enzima que abunda en hígado, músculo esquelético y eritrocitos; también se encuentra en menor cantidad en corazón, riñón y aún menos en páncreas y pulmón.
Existendos genes que codifican dos polipéptidos diferentes: M (Muscle, músculo) y H (Heart, corazón). Estos monómeros se combinan formando los tetrámeros activos (PM 134.000). Se han podido separar por electroforesis nativa en geles de poliacrilamida 5 isoenzimas de LDH las cuales están conformadas como se muestra en el siguiente esquema:
% de la LDH total (suero normal)
H-HH-Hó H4LDH123,4 ± 3
H-H
H-Mó H3MLDH244,0 ± 4
H-H
M-Mó H2M2LDH325,0 ± 1,5
H-M
M-Mó HM3LDH4 6,0 ± 2
M-M
M-Mó M4LDH5 2,0 ± 1

Como las isoenzimas LDH1 y LDH5 tienen una conformación proteica diferente, cada una presenta propiedades distintas. Tienen diferente estabilidad a la desnaturalización por temperatura (LDH1 esestable a 65oC por 30 min y LDH5 es lábil al calor y al frío) y diferente resistencia a varios agentes químicos inhibidores. También difieren en su movilidad electroforética: LDH1 es de migración rápida y LDH5 es la más lenta, mientras que LDH2, LDH3 y LDH4 tienen migraciones intermedias, como se muestra en la Figura 1.
158750066675Suero Normal
Lugar de siembra
LDH 1LDH2LDH3LDH4LDH5
(+)
(-)00Suero Normal
Lugar de siembra
LDH 1LDH2LDH3LDH4LDH5
(+)
(-)

Figura 1
Las isoenzimas de la LDH tienen diferente afinidad por los sustratos (especialmente por el piruvato) y coenzimas. Por ejemplo la LDH1 tiene un Km elevado para el piruvato, la Vmax a la cual lo reduce es baja y además resulta inhibida por un exceso de éste, mientras que LDH5 tiene un Km muy bajo para el mismo sustrato yla Vmax a la cual lo reduce es elevada. Las otras isoenzimas tienen propiedades intermedias entre las LDH1 y LDH5 y se parecerán más a una o a otra dependiendo de que tengan mayor proporción de monómero H o M. Estas características cinéticas son muy importantes pues se relacionan con la función metabólica que estas isoenzimas cumplen en los diferentes tejidos. Es de interés el hecho de que laproporción de las diversas isoenzimas de LDH varíe de un tejido a otro, y por lo tanto los perfiles electroforéticos de las isoenzimas de la LDH de distintas fuentes son diferentes. En los órganos con alto consumo de oxígeno y pequeña resistencia a la anoxia (músculo cardíaco y cerebro) y en eritrocitos, predominan las isoenzimas LDH1 y LDH2, mientras que en otros órganos con mayor reserva deglucógeno (hígado y músculo esquelético), hay preponderancia de las LDH4 y LDH5, indicando su adaptación a un determinado tipo de metabolismo energético (Figura 2).
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