laguna

Protocolo de Laboratorio
Determinación del contenido de TCA
transferible

1.

Codi: PL-QL-23
Rev: 01
Fecha: 30/01/2007
Pagina 1 de 5

OBJETIVO

Establecer el método de control de los fenómenos
de migración que se pueden producir cuando los
tapones de corcho se utilizan para cerrar las
botellas de vino. Consiste en la determinación del
contenido de TCA transferible basándose en laexistencia de un equilibrio entre la concentración
de TCA en la matriz sólida (corcho) y la matriz
liquida (solución hidroalcohólica como simulante
vínico), después de un periodo de maceración de
una muestra de tapones de corcho en una solución
hidroalcohólica.

2.

REFERENCIAS

Norma UNE 56930 :2005
Norma ISO/DIS 20752:2007 para el control de los anísoles. (Método SPME)

3.PRINCIPIO

Este método se basa en la determinación del TCA transferido a un simulante vínico, mediante
microextracción en fase sólida (SPME) seguida de la detección y cuantificación de este compuesto por
cromatografía de gases/espectrometría de masa (GC/MS)

4.
-

REACTIVOS Y EQUIPOS

Etanol absoluto (PA)
Agua destilada
Solución hidroalcohólica al 12% (simulante vínico)
Cloruro sódico(NaCl) (PA)
2,4,6- Tricloroanisol (TCA), 99% CAS 87-40-1
Patrón interno 2,4,6- Tricloroanisol deuterado (d5-TCA)
TeCA, PCA substancias para establecer muestras para determinación del TeCA o PCA transferible
Acetona PA-ACS-ISO
Ciclohexano PRS
Matraz aforado 100 ml
Matraz aforado 250 ml
Matraz aforado 1000 ml
Pipeta ajustable de 0-20 μl
Pipeta ajustable de 20-200 μl
Puntas de dosificaciónpara pipetas de 200 μl
Bascula Gram L10 resolución 1 mg
Pipetas de 1, 2, 5 y 10 ml
Recipientes para guardar disoluciones madres e
hijas
Cromatógrafo de gases Agilent 6850 GC
Espectrómetro de masa Agilent 5975 B
Viales de 20 ml referencia: 5188-2753
Tapón screwcap para viales referencia 5188-2759
Frascos estéril de 120 ml y 1500 ml para guardar muestras patrón madre e hija
Frascos concierre de 400 ml para maceración del corcho con el simulante vínico

Protocolo de Laboratorio
Determinación del 2,4,6 – tricloroanisol
(TCA) transferible

TCA DISOLUCIONES
concentracion (ng/litro)

Volumen 2 (ml)

concentracion (ng/litro)

100.000.000,000

20
50

993,039

10

993,039

20

993,039

30

993,039

40

993,039

50

993,039

100

10
10
10
1010
10
10
10

199600,8

199.600,798

2
3
4
5
6
7

μL

993,0
0,99
1,98
2,97
3,96
4,94
9,83

TCA D5 DISOLUCIONES
concentracion (ng/litro)

μL

Volumen 2 (ml)

concentracion (ng/litro)

80.000.000,0

100

15

529801,32

529.801,3

100

15

3508,62

3.508,6

50

10

17,44

Codi: PL-QL-23
Rev: 01
date: 12/03/2007
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Protocolo deLaboratorio
Determinación del 2,4,6 – tricloroanisol
(TCA) transferible

5.

Codi: PL-QL-23
Rev: 01
date: 12/03/2007
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METODOLOGIA

5.1 Preparación de las soluciones patrón (ver tabla página 2)
Se prepara una solución madre de 2,4,6- TCA de 100 μg/ml de concentración disolviendo en
etanol absoluto. Las otras disoluciones se efectúan con el simulante vínico (soluciónhidroalcohólica al 12%).
El intervalo de concentraciones de las soluciones patrón de TCA están comprendido entre 0,5
ng/l y 50 ng/l. Paralelamente, se prepara una solución de patrón interno de 2,4,6- TCA
deuterado preparada como el caso anterior para conseguir una concentración del orden de 20
ng/l

5.2 Preparación de la muestra
5.2.1 La preparación de la muestra es distinta según el tipo detapón a
analizar:
- Tapón de corcho natural de una o varias piezas, tapón natural
colmatado y tapón aglomerado:
Introducir 10 tapones con 200 ml de simulante vínico en un frasco.
(Botes tapa metal Twist-off a rosca Ref.008.500 altura sin tapa 113
mm, diámetro cuerpo 80 mm, diámetro interior de la boca 64 mm)

- Tapón aglomerado con 2 discos de corcho natural:
Separar de 10 tapones de...