lalala
Páginas: 3 (717 palabras)
Publicado: 20 de junio de 2013
INTRODUCCION
El ADN es una molécula de longitud gigantesca que esta presente en cada célula viva. Es la encargada de transmitir de generación en generación las instrucciones necesarias para formarun organismo, y controla todas las actividades de las células durante el tiempo de vida del organismo. También es un ácido nucleico formado por nucleótidos. Cada nucleótido consta de tres elementos:un azúcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o ácido ribonucleico, el azúcar que lo forma es una ribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. Si la molécula tiene sólo el azúcar unidoa la base nitrogenada entonces se denomina nucleósido.
La extracción del ADN es un procesos el cual nos permite observarlo de una forma más sencilla el ADN. Este constituye el material genético delos organismos siendo el componente primarios de los cromosomas y el material del que los genes están formados pero su extracción es proceso complejo ya que se deben realizar ciertos procesos en lascélulas para así permitir la separación de este al final del proceso.
OBJETIVO
1. Extraer ADN a partir de muestras biológicas.
2. Realizar una comparación entre dos técnicas de aislamiento de DNA.MATERIALES
• Buffer TE 1X (Tris 0,01M, EDTA 0,02M, pH = 8,5)
• Chelex– 100
• Kit de extracción de ADN
• Micropipetas de 20 – 100, 100 - 1000 μl.
• Puntas de 10 -100 μl y de 100 -1 000 μl• Tubos ependorf de 1,5 mL
• Microcentrífuga16000 rpm
• Vortex
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Extracción del ADN usando chelex - 100
1. Se colocó una muestra de tejido, sangre o raspado bucalen un tubo ependorf de 1.5 ml conteniendo 0.5ml de buffer TE, dejando reposar por 2mL
2. Se re suspendió las células con un toque de vórtex por 3 min.
3.Se centrifugo a 5000 rpm por 4 min.4.Se elimino el sobrenadante
5. Al pellet celular obtenido se le adiciono 500 uL de una solución de resina de Chelex-100 al 10% y se agito en un vortex por 3 min.
6. Se dejo incubando a 55ºC...
El ADN es una molécula de longitud gigantesca que esta presente en cada célula viva. Es la encargada de transmitir de generación en generación las instrucciones necesarias para formarun organismo, y controla todas las actividades de las células durante el tiempo de vida del organismo. También es un ácido nucleico formado por nucleótidos. Cada nucleótido consta de tres elementos:un azúcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o ácido ribonucleico, el azúcar que lo forma es una ribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. Si la molécula tiene sólo el azúcar unidoa la base nitrogenada entonces se denomina nucleósido.
La extracción del ADN es un procesos el cual nos permite observarlo de una forma más sencilla el ADN. Este constituye el material genético delos organismos siendo el componente primarios de los cromosomas y el material del que los genes están formados pero su extracción es proceso complejo ya que se deben realizar ciertos procesos en lascélulas para así permitir la separación de este al final del proceso.
OBJETIVO
1. Extraer ADN a partir de muestras biológicas.
2. Realizar una comparación entre dos técnicas de aislamiento de DNA.MATERIALES
• Buffer TE 1X (Tris 0,01M, EDTA 0,02M, pH = 8,5)
• Chelex– 100
• Kit de extracción de ADN
• Micropipetas de 20 – 100, 100 - 1000 μl.
• Puntas de 10 -100 μl y de 100 -1 000 μl• Tubos ependorf de 1,5 mL
• Microcentrífuga16000 rpm
• Vortex
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Extracción del ADN usando chelex - 100
1. Se colocó una muestra de tejido, sangre o raspado bucalen un tubo ependorf de 1.5 ml conteniendo 0.5ml de buffer TE, dejando reposar por 2mL
2. Se re suspendió las células con un toque de vórtex por 3 min.
3.Se centrifugo a 5000 rpm por 4 min.4.Se elimino el sobrenadante
5. Al pellet celular obtenido se le adiciono 500 uL de una solución de resina de Chelex-100 al 10% y se agito en un vortex por 3 min.
6. Se dejo incubando a 55ºC...
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