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CAPITULO 12, libro “Biología, conceptos y relaciones” Campbell


1) En qué consiste la tecnología del ADN recombinante?

Es una molécula híbrida formada por ADN de dos o más organismos diferentes. Por lo tanto, la tecnología de ADN recombinante es el conjunto de técnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulación e inserción en otrodiferente. De esta manera podemos hacer que un organismo (animal, vegetal, bacteria, hongo) o un virus produzcan una proteína que le sea totalmente extraña.
El desarrollo de la tecnología del ADN recombinante fue posible gracias a varias líneas de investigación: 1) el conocimiento de las enzimas de restricción, 2) la replicación y reparación de ADN, 3) la replicación de virus y plásmidos y 4) lasíntesis química de secuencias de nucleótidos.


2) Explique los tres mecanismos que utilizan las bacterias para incorporar nuevos genes, en cada caso ilustre con esquemas: transformación, transducción, conjugación

3) ¿Qué es un plásmido? Explique los pasos a seguir para usarlos en la técnica de ingeniería genética, ilustre.

¿Qué es un Plásmido? Los plásmidos son moléculas circulares de ADNque se replican de manera independiente al cromosoma de la célula hospedera. De manera natural se encuentran en las bacterias en tamaños que van desde 5,000 hasta 400,000 pb.

4) Explique la función que cumplen las enzimas de restricción y las ligasas del ADN.
Enzimas de Restricción: restringen el crecimiento de bacteriófagos. Una enzima de este tipo corta el ADN en el sitio en que ocurre unasecuencia especifica de nucleótidos. Otras enzimas de restricción cortan diferentes secuencias. Muchas de ellas dejan colas de cadena única o “extremos pegajosos” sobre los fragmentos de ADN.
Ligasas de ADN: aceleran la formación de enlaces covalentes entre extremos pegajosos complementarios en una mezcla de fragmentos de ADN.

5) ¿En qué consiste la técnica de uso de la transcriptasa inversapara hacer genes clonados y qué ventajas tiene?

La transcriptasa inversa, una enzima de replicación de ciertos tipos de virus, transcribe el ARNm a ADN. Esta enzima emplea el ARNm como patrón para ensamblar una cadena de ADN complementario, o ADNc:
La ADN polimerasa que se agrega a la mezcla retira el ADN de la molécula híbrida a medida que copia el ADNc en una segunda cadena de ADN. Elresultado es una copia de ADN de doble cadena del ARNm original.

6) ¿En aspectos moleculares, a qué se llama sonda y qué utilidad tienen?

Una Sonda es un fragmento de ADN marcado, y sirve para localizar algún gen de interés en una célula en medio de miles o millones que no tengan este gen. Los investigadores localizan con precisión un clon que alberga el gen, detectando el marcador de la sonda.7) Explique en qué consiste la electroforesis en gel. ¿Para qué puede ser utilizada?

La electroforesis en gel es una técnica sencilla empleada de forma rutinaria en laboratorio para separar moléculas biológicas especialmente ADN, ARN y proteínas. La electroforesis también es una técnica habitual en el laboratorio clínico. Permite separar especies químicas (ácidos nucleicos o proteínas) a lolargo de un campo eléctrico en función de su tamaño y de su carga eléctrica. Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, tienen por naturaleza carga negativa.
Si ponemos fragmentos del ADN extraído de una muestra biológica sobre un soporte poroso (gel de agarosa) y aplicamos un campo eléctrico, se producirá la migración diferencial de los fragmentos a través de los poros de la matriz.
La tinción del gel conbromuro de etidio, que es una sustancia fluorescente que se intercala en la molécula de ADN, y la exposición con luz ultravioleta, permite observar el resultado de ésta migración.

La electroforesis de ADN es útil para comparar patrones de bandas de diferentes muestras biológicas. Así por ejemplo se puede usar para comparar muestras de individuo sano frente a individuo enfermo, para la...