Lamber-beer

Titulo

ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

PRACTICA No 1
RUTINAS DE DIAGNOSTICO

Objetivo

Conocer las partes principales y el manejo de un Espectrofotómetro UV-Vis. Y verificar las condicionesdel equipo.

Introducción teorica

Ley de Lambert-Beer
Expresa la relación entre la absorbancia y la concertación:

A= e l c
Donde:
A= absorbancia óptica
e= coeficiente de extinción molar
c=concentración de la disolución

Tiene ciertas limitaciones y, así, en algunos casos la relación entre a y c puede dejar de ser lineal. Esto es debido a que la ley de Lambert-Beer solo cumple en lassiguientes condiciones:

• La concertación de la especie absorbente debe ser baja
• La radiación utilizada debe ser monocromática
• E único mecanismo de interacción entre la radiaciónelectromagnética y la especie absorbente es el de absorción
• Las especies absorbentes no deben interaccionar entre si ni con el disolvente
• Las especies absorbentes no deben sufrirtransformaciones fotoquímicas
• La absorción estudiada corresponde a un volumen de sección transversal uniforme.

Espectrofotómetro

Partes del espectrofotómetro

[pic]

La luz pasaalternadamente a través de la muestra y la referencia mediante un espejo rotatorio que dirige el haz de luz
Cuando la luz pasa a través de la muestra, el detector mide la irradiancia P. cuando el cortadordirige el haz a la cubeta de la referencia, el detector mide Po. El haz se corta varias veces por segundo, y el circuito compara automáticamente P y Po para obtener la transmitancia y la absorbancia. Esteprocedimiento posibilita una corrección automática de los cambios de intensidad de la fuente y de la respuesta del detector, con el tiempo y la longitud de onda, porque la potencia que emerge de lasdos muestras se compara con mucha frecuencia. La mayoría de los espectrofotómetros de calidad destinados para investigación permiten un barrido automático de longitudes de onda y un registro de...