Las diluciones

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA Y BIOANÁLISIS
INMUNOLOGÍA Y LABORATORIO 2007-I

DILUCIONES

1. Dilución Simple (Método del factor de dilución)
Una dilución simple es aquella en la cual una unidad de volumen de un material líquido de interés se combina con un volumen apropiado de un solvente líquido para alcanzar la concentración deseada. El factor dedilución es el número total de unidades de volumen en los cuales su material será disuelto. El material diluido se debe mezclar muy bien para alcanzar una dilución verdadera.

Ejemplo: La pulpa de jugo congelada generalmente se debe diluir en 4 vasos de agua (el solvente de la dilución) dando un factor de dilución 5. Es decir, el concentrado de jugo representa 1 unidad de volumen al cual usted leadiciona 4 unidades más de volumen (el agua). De esta forma, su pulpa de jugo está distribuida en las 5 unidades de volumen. Esta sería una dilución 1:5 y ahora la pulpa de jugo es 1/5 del concentrado original. Así pues, en una dilución simple usted agrega una unidad de volumen de solvente de acuerdo con el factor de dilución deseado.

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2. Dilución seriada
Unadilución seriada es simplemente una serie de diluciones simples que amplifican el factor de dilución rápidamente, comenzando con una pequeña cantidad inicial de muestra (cultivo de bacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.). La fuente del material para diluir en cada paso viene del material diluido en el tubo anterior. En una dilución seriada el factor de dilución total en cualquier punto es elproducto del factor de dilución individual en cada uno de los tubos.

Ejemplo: En el laboratorio de microbiología usted realizará una dilución seriada 1:100 de un cultivo de bacterias en tres pasos (ver figura). El paso inicial combina 1 unidad de volumen del cultivo con 99 unidades de volumen de caldo = dilución 1: 100. En el siguiente paso usted combina 1 unidad de volumen del cultivo diluido1:100 con 99 unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora tiene una dilución 1:10.000 (1:100 x 100 = 1:10000). En el tercer paso usted combina 1 unidad de volumen del cultivo diluido 1:10000 con 99 unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora tiene una dilución 1:1.000.000 (1:100 x 10,000 = 1:1,000,000). La concentración del cultivo es ahora una millonésima parte menos que en lamuestra original.
3. Cómo hacer volúmenes fijos de concentraciones específicas:
Método de V1C1=V2C2
Con frecuencia usted necesita hacer una cantidad determinada de una solución con una concentración conocida debido a la disponibilidad limitada de materiales (algunos químicos son muy costosos y solo se venden o utilizan en pequeñas cantidades e. g. microgramos) o para evitar el desperdicio dematerial. La fórmula V1C1 = V2C2 es un método rápido para calcular tales diluciones, donde:
V = volumen, C = concentración; en cualquier unidad que usted esté trabajando
(Atributos de la solución fuente) V1C1=V2C2 (atributos de la nueva solución)

Ejemplo: Suponga que usted tiene 3 ml de una solución madre de ampicilina a una concentración de 100 mg/ml y usted quiere hacer 200 ul de unasolución que tenga una concentración de 25 mg/ml. Usted necesita saber qué volumen de la solución madre necesita usar para hacer los 200 ul del volumen total necesitado.
V1 = El volumen de la solución madre con el cual usted partirá para hacer la segunda solución. Este valor es desconocido para usted.
C1 = 100 mg/ml (la concentración de la solución madre)
V2 = 200 ul (volumen total de la solución queusted va a preparar con una nueva concentración).
C2 = 25 mg/ml (la nueva concentración)
Por ordenamiento algebraico:
V1 = (V2 x C2) / C1
V1 = (0.2 ml x 25 mg/ml) / 100 mg/ml = 0.05 ml = 50 ul
Por lo tanto, usted debe tomar 0.05 ml, es decir, 50 ul de la solución madre y diluirla con 150 ul de solvente para lograr los 200 ul de la solución con una concentración de 25 mg/ml (recuerde que...