Las mariposas

VERIFICACION DE LA TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE PARA LA IDENTIFICACION DE COLIFORMES TOTALES Y Escherichia coli EN MUESTRA DE ALIMENTOS DE ATUNEC S.A

CARMEN PATRICIA HERRERA ARDILA

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA PAMPLONA 2010

VERIFICACION DE LA TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE PARA LA IDENTIFICACION DE COLIFORMES TOTALES YEscherichia coli . EN MUESTRA DE ALIMENTOS DE ATUNEC S.A

CARMEN PATRICIA HERRERA ARDILA

ASTRID RONCANCIO Directora Aseguramiento de Calidad –Atunec S.A. Bacterióloga Director del proyecto

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA PAMPLONA 2010

NOTA DE ACEPTACIÓN

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Firma del jurado

_______________________________________ Firma del jurado

Pamplona 1,de Diciembre 2010

TABLA DE CONTENIDO PAGINAS INTRODUCCION …………………………………………………………………..9

1.OBJETIVOS……………………………………………………….…………….. 12 1.1 OBJETIVO GENERAL………………………………………………………….12 1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………………..12 2. JUSTIFICACION ……………………………………………………………….13 3. MARCO REFERENCIAL ………………………………………………………15 3.1 MARCO HISTÓRICO DE LA EMPRESA ………………………………….. 15 3.2 Bases legales …………………………………………………………………...17 3.3 Marco teórico18 3.3.1 Metrología…………………………………………………………………….19 3.3.2 Estudio de repetibilidad yreproducibilidad………………………………. 20 3.3.2.1 Repetibilidad………………………………………………………………. 21 3.3.2.2 Reproducibilidad……………………………………………………………22 3.3.3 Método de repetibilidad y reproducibilidad……………………………….. 24 3.3.4 Cálculos estadísticos de precisión: repetibilidad y reproducibilidad………......................................................................................29 3.3.5Selectividad…………………………………………………………………..31 4. METODOLOGIA………………………………………………………………….45 4.1 Microorganismos y preparación del inoculo……………………………….. 45 4.2 Obtención y pretratamiento del lomo de pescado …………………………45 4.3 Control de equipos…………………………………………………………….45 4.4 Control de calidad de medios de cultivo……………………………………. 45 4.5 Control macroscópico…………………………………………………………46 4.6 Control de esterilidad………………………………………………………….46

4.7 Control de pH…………………………………………………………………..464.8 Control de ambientes ………………………………………………………..46 4.9 Control positivo del medio LMX fluorocult………………………………47 4.10 Dilución y homogenización de la muestra ………………………………47 4.11 Verificación de la técnica del número más probable…………………….48 4.11.1 Prueba de selectividad y productividad para los medios lmx Fluorocult y BHI…………………………………………………………………….48 4.11.2 Numero Más Probable (NMP) en caldo LMX –FLUOROCULT……..48 4.11.3 métodos de análisis………………………………………………………...49 5. CRONOGRAMAS DE ACTIVIDADES……………………………………….50

6. RESULTADOS Y ANALISIS …………………………………………………..51 6.1 Microorganismos y Preparación del inoculo……………………………….. 51 6.2 Control de Equipos:…………………………………………………………….51 6.3 Control de calidad de medios de cultivo:…………………………………….52 6.3.1 Control macroscópico:……………………………………………………….53 6.3.2Control de esterilidad………………………………………………………...54 6.3.3 Control de pH:………………………………………………………………...54 6.3.4 Control de ambientes:………………………………………………………..55 6.3.5 Control positivo del medio LMX fluorocult:………………………………...56 6.4 Verificación de la técnica del Número Más Probable:……………………...58

6.4.2 Ensayo de repetibilidad y reproducibilidad de la técnica Numero Más Probable (NMP) en caldo LMX -fluorocult:……………………………………...58

3

7. 8. 9.

CONCLUSIONES………………………………………………………………66 RECOMENDACIONES O SUGERENCIAS. ……………………………….68 GLOSARIO. …………………………………………………………………….69

10. BIBLIOGRAFIA…………………………………………………………………72 11. ANEXOS…………………………………………………………………………73

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LISTA DE TABLAS

Páginas

Tabla 1. Tabla 2.

Cálculo del valor t...