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ESTUDIO SOBRE LA VALIDEZ DE LAS CEPAS DE REFERENCIA DESPUÉS DEL 5º PASE A PARTIR DE LAS CEPAS DE ORIGEN PARA LOS DIFERENTES CONTROLES DE CALIDAD EN EL LABORATORIO DE SANIDADE E PRODUCIÓN ANIMAL DE GALICIA (LASAPAGA)

Méndez Gándara, Antonio (xefe de área de Bacterioloxía do LASAPAGA); Lamas López, Amada (xefa de sección de Bacterioloxía do LASAPAGA), Gómez Gómez, Verónica (veterinaria dodepartamento de Bacterioloxía do LASAPAGA). Junio 2012.


RESUMEN:

Durante la auditoría de ENAC realizada en el departamento de Bacterioloxía del Laboratorio de Sanidade e Produción Animal de Galicia (LASPAGA) el 31 de mayo de 2012 se cuestionó la validez de las cepas de referencia utilizadas en este centro para los controles internos y verificación de los medios de cultivo. Nosotrosconsideramos que, para los fines a los que se destinan dichas cepas, los pases que hayan podido sufrir desde la cepa de colección (4 o menos) no afectan, en absoluto, a su calidad. Para demostrarlo, sometimos a las cepas de trabajo en uso en ese momento hasta a 6 nuevos pases. En cada uno de ellos se repitieron las pruebas bioquímicas de identificación mediante el sistema Phoenix o el sistema ATB y, lascepas gram negativas, fueron sembradas en medios específicos (XLD, SS, SM2 y MacConkey) para comprobar que seguían presentado las características adecuadas. Las cepas en 4º pase no se incubaron inmediatamente, sino que se mantuvieron en refrigeración 24 horas y, al día siguiente fueron incubadas unas horas hasta obtener cierto crecimiento a partir del cual se realizó un 6º pase y siguieronincubándose ambos el tiempo establecido. Además, entre el 5º y el 6º repique los microorganismos fueron sometidos a un proceso de liofilización tras el que se reconstituyeron nuevamente y se sometieron a las pruebas descritas antes de ser utilizadas para realizar los controles internos de calidad (límite de detección, precisión intermedia y recuperación, según el tipo de ensayo). En todos los casoslos resultados de las pruebas fueron satisfactorios lo que demuestra la validez de dichas cepas y que los pases efectuados por Microbiologics no afectan a las características morfológicas, bioquímicas y metabólicas de las mismas.



INTRODUCCIÓN:

Durante la auditoría realizada por ENAC en el departamento de Bacterioloxía del Laboratorio de Sanidade e Produción Animal de Galicia (LASAPAGA)el pasado 31 de mayo de 2012 se puso en duda, por parte de la auditora (Ana Audicana), la validez de las cepas de referencia que utilizamos para los controles de calidad internos y verificación de medios de cultivo. Según la señora Audicana las cepas adquiridas al laboratorio Microbiologics no podían usarse como tales cepas de referencia ya que, en su opinión, se trataba de cepas de trabajo. Larazón era que habían sufrido algún pase desde la cepa de la colección ATCC.

Por ello hemos realizado una serie de ensayos y experimentos para demostrar que los sucesivos repiques no afectan en nada a las características necesarias para el desarrollo del trabajo de este laboratorio, especialmente en todo aquello que tiene que ver con las técnicas acreditadas o en vías de acreditación.MATERIAL Y MÉTODOS



CEPAS UTILIZADAS PARA LOS EXPERIMENTOS:


Las cepas de trabajo usadas están descritas en la siguiente tabla (tabla 1.). Proceden todas de las cepas adquiridas al laboratorio Microbiologics, excepto Salmonella Hadar, Salmonella Virchow y Salmonella Infantis que proceden de ensayos interlaboratoriales. El procedimiento para su obtención está descrito en la instrucciónINO2BA:

|Microorganismo |Nº cepa trabajo |Fecha reconstitución |Suministrador |
|Salmonella Typhimurium ATCC 14028 |14028-2-21 |07/05/2012 |MICROBIOLOGICS |
|Salmonella Enteritidis ATCC 13076 |13076-3-11 |07/05/2012 |MICROBIOLOGICS...