leishmania

60
Rev Biomed 1994; 5:60-69.

Identificación de protozoarios
del género Leishmania con sondas biotinadas de kDNA en la
Península de Yucatán, México.

José Pérez-Mutul, Luis Balam-Tzeek, Silvia Canto-Lara.
Centro de Investigaciones Regionales “Dr. Hideyo Noguchi”, Universidad Autónoma de Yucatán.
Mérida, Yucatán, México.

RESUMEN.
Antecedentes.- Estudios epidemiológicos recientes han mostrado quela región selvática de la
Península de Yucatán constituye una zona endémica importante de la Leishmaniasis cutánea, conocida como “úlcera del chiclero”. La identificación del parásito es importante para el diagnóstico
y para evaluar el tratamiento de la enfermedad.
Objetivo.- En el presente trabajo identificamos
los parásitos aislados de enfermos con “úlcera del
chiclero” procedentes de laPenínsula empleando
metodología de hibridación con sondas biotinadas
de kDNA.
Material y métodos.- Purificamos el DNA total
de 134 cepas de parásitos de Leishmania aislados
de sendos pacientes. Purificamos el kDNA de dos

cepas de referencia (OMS) y lo marcamos con la
técnica de “nick translation”. Analizamos por hibridación en “dot blot” las 134 preparaciones de
DNA con las sondas biotinadas. Revelamoslos
híbridos con el sistema estreptavidina/fosfatasa
alcalina.
Resultados.- Hemos identificado con esta metodología 3 aislados como Leishmania braziliensis
(2.2%) y 131 como Leishmania mexicana (97.8%).
Conclusiones.- Demostramos por primera vez la
presencia de Leishmania braziliensis en la Península de Yucatán, México.

Palabras claves: Leishmania, hibridación, kDNA
biotinado.

Solicitud desobretiros: José Pérez-Mutul. Centro de Investigaciones Regionales “Dr. Hideyo Noguchi”. Universidad Autónoma de Yucatán. Av. Itzaes No. 490 x 59.
C.P. 97000. Mérida, Yucatán, México. Fax: (99) 23-61-20.
Recibido el 9/Feb./1994. Aceptado para publicación el 16/Mayo/1994.

Vol. 5/No. 2/Abril-Junio, 1994.

61
J Pérez-Mutul y cols.
SUMMARY.
IDENTIFICATION OF PROTOZOAN FROM
THE
GENUS
LEISHMANIA
BYBIOTINYLATED kDNA PROBES IN THE
PENINSULA OF YUCATAN, MEXICO.
Antecedents.- Recent epidemiological studies have
shown that the sylvatic region of the Peninsula of
Yucatan in Mexico is an important endemic area
of cutaneous leishmaniasis, known as “chiclero’s
ulcer”. Parasitological identification is essential
for diagnosis and to establish appropiate treatment.
Objective.- In this paper, we report theidentification of the parasites isolated from patients
with “chiclero’s ulcer” in the Yucatan, Mexico by
using DNA hybridization techniques with
biotinylated kDNA probes.
Material and Methods.- All the DNA from 134
different strains of Leishmania was purified, kDNA
of two reference strains was isolated and labeled
by nick translation. We analysed the 134 DNA
preparations by dot blot DNA hybridizationwith
the biotinylated probes and identified the hybrids
by streptavidin and a biotin-conjugated alkaline
phosphatase.
Results.- By using this methodology, we identified
3 strains of Leishmania braziliensis and 131 strains
of Leishmania mexicana.
Conclusions.- The presence of L. braziliensis has
been demonstrated in the Peninsula of Yucatan,
Key words: Leishmania, nucleic
hybridization,biotinylated kDNA.

acids

INTRODUCCION.
Los protozoarios del género Leishmania causan un amplio espectro de enfermedades en el
hombre, las cuales varían desde la forma visceral
hasta las formas cutánea y mucocutánea (1). Ciertas especies del parásito se han asociado con las
Revista Biomédica

diferentes formas clínicas (2). Por ello, la
patogenicidad, el tratamiento y los métodos para
controlar laenfermedad en el humano están determinados, al menos en parte, por la especie de
Leishmania infectante. En las zonas endémicas
donde existen más de una especie patógena, la
identificación temprana del parásito durante la infección es importante para el diagnóstico y para
evaluar el tratamiento y el pronóstico de la enfermedad (3).
Estudios clínicos y epidemiológicos recientes (4,5) han demostrado que...