Leptospira

I. Explique el fundamento de la prueba de Inmunofluorescencia directa e indirecta y determine las enfermedades bacterianas en las que se utiliza esta técnica como diagnóstico.

IF Directo
En estemétodo se utiliza antisuero marcado para cada sustancia que se investigue (bacteriano, vírico o proteico); así, cuando el suero anti salmonella fluorescente se aplica a una extensión, procedente deun cultivo que contenga microorganismos del género Salmonella, reacciona con el antígeno homólogo, demostrándose una reacción específica antígeno-anticuerpo por fluorescencia de las bacteriasrevestidas con el anticuerpo.

IF Indirecto
El antisuero (por ejemplo el de anti salmonella preparado en conejo) no se marca, sino que se emplea conjugado con suero antiglobulina fluorescente, a través deuna técnica en dos tiempos. La extensión con la bacteria en cuestión se “inunda” con el suero conejo antibacteriano. Después de 10-30 minutos, el suero que no haya reaccionado se elimina mediantelavado, tratándose a continuación con globulina anticonejo fluorescente. Las células bacterianas que hayan reaccionado con el antisuero, estarán revestidas con el anticuerpo (globulina) de conejo, y enconsecuencia, reaccionarán con la globulina anticonejo marcada, de tal manera que se pueden identificar por la fluorescencia.

II. ¿Qué ventajas puede tener la utilización de la técnica de IF sobreotras pruebas de diagnóstico?
* Alta especificidad, por lo que se unen fuertemente.
* Alta selectividad, por lo que pueden diferenciar dos antígenos muy similares.
* Alta sensibilidad,porque pueden detectar cantidades muy bajas de antígeno.
* Estequiometricidad, existe una proporción entre la cantidad de antígeno y la cantidad de reacción antígeno-anticuerpo.
El propósito deestas técnicas es el de localizar el complejo específico antígeno-anticuerpo, ya que éstos no son visibles directamente al microscopio. Se han desarrollado varios métodos, directos e indirectos, para la...