ley 87-01

Walnelys Guadalupe Contreras Guzmán 100076274 Sección: 15
TECNICAS DE TINCION DE GRAM, ZIEHL NEELSEN Y DE GIN
La tinción de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología parala visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a lamorfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradasy Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella.
METODOLOGIA
Recoger muestras.
Hacer el extendido en espiral.
Dejar secar a temperatura ambiente.
Fijar la muestra conmetanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
Agregar azul violeta y esperar 1 min. Todas las células gram positivas y gram negativas se tiñen de color azul-purpura.
Enjuagar conagua.
Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
Enjuagar con agua.
Agregar acetona y/o alcohol y esperar hasta 1 minuto aproximadamente. Enjuagar con agua.
Tinción de contrasteagregando safranina o fucsina básica y esperar 30 segundos. Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.
Para observar al microscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersión.La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis.
Fue descrita por primeravez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl, un bacteriólogo y Friedrich Neelsen, un patólogo.
METODOLOGIA:
Hacer un frotis.
Dejarlo en el puente de tinción.
Aplicar fucsina-fenicada (solución confenol y mayor concentración de fucsina).
Dejar en vasos coplin durante 20 minutos.
Decolorar con alcohol ácido.
Lavar con agua del grifo.
Contrastar con azul de metileno
Las bacterias que...