Ley de Lambert-Beer

Páginas: 2 (397 palabras) Publicado: 29 de marzo de 2014
Es el resultado de la combinación de las leyes de absorción de ambos e indica la relación
directamente proporcional que existe la absorbancia de una muestra y su concentración, al ser
OD71 –Bioquímica para Odontología

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constantes los valores de trayecto óptico (b=1cm), la longitud de onda de la radiación incidente y
absorbida, expresada como absortividad molar con elcoeficiente de absortividad molar
“ε”(épsilon).
A= log I0/I = ε.b.c

Siendo:
I0 e I = Intensidad de la radiación e intensidad de la radiación final, después de haber travesado la
cubeta de lamuestra, respectivamente.
A = Absorbancia, Medida de la absorción de la radiación. También se conoce como densidad
óptica o extinción.
Es una magnitud adimensional. Generalmente los espectrofotómetrosexpresan la absorbancia
hasta las milésimas. Suelen ser magnitudes que oscilan entre 0 y 1, aunque en determinados
análisis en los que se mide la variación de absorbancia con el tiempo puedenobtener alores
superiores.
B = Trayecto óptico, su valor está estandarizado en 1 cm. Es la longitud de la muestra que
atraviesa la radiación cuando ésta se encuentra depositada en una cubeta. Esuna medida
estandarizada para todos los espectrofotómetros.(1 cm).
C = Concentración de la sustancia (analito) de la muestra. Suele expresarse en moles/L (con la
absortividad molar) o g/L (si seemplea la absortividad): Si se despeja de la ecuación de la ley de
Lambert-Beer.

CALCULO DE CONCENTRACIONES.
Para obtener la concentración de una muestra problema se pueden utilizar dosprocedimientos:
Factor de calibración.
Curvas de calibración.

Factor de calibración:
Es la concentración de una sustancia que corresponde a una unidad de medida,
generalmente 0,001 deabsorbancia.
FC = Concentración del patrón/ lectura del patrón(en absorbancia)

Esta fórmula deriva de la densidad óptica o absorbancia del problema:
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