LIBRO DE BIOTE La manipulaci n del gen
Páginas: 9 (2092 palabras)
Publicado: 6 de septiembre de 2015
LIBRO DE BIOTE La manipulación del gen
Expresión en procariotas
EL objetivo principal del gen clonación para aplicaciones biotecnológicas es la expresión del gen clonado en un organismo huésped seleccionado.
Desafortunadamente, la inserción de un gen en un vector de clonación no
garantiza necesariamente que va a ser expresado con éxito . Además, para
muchos propósitos comerciales, una altatasa de producción de la proteína
codificada por el gen clonado se requiere. En respuesta a la necesidad de un alto
tasa de expresión , se han creado muchos vectores de expresión especializados
que proporcionan elementos genéticos para controlar la transcripción , traducción,
estabilidad de la proteína , y la secreción del producto del gen clonado a partir de la célula huésped.
Las característicasbiológicas moleculares que han sido manipulados para
modular la expresión génica incluyen el promotor y terminador de la transcripción
secuencias, la fuerza del sitio de unión al ribosoma - , el número de copias del gen clonado y si el gen es el plásmido cargo o integrada en el genoma de la célula huésped, la localización celular final de la proteína extraña sintetizada, la eficiencia de latraducción en el huésped organismo, y la estabilidad intrínseca dentro de la célula huésped de la proteína codificada por el gen clonado.
No existe una estrategia única para la obtención de máxima expresión de cada gen clonado. Consideración del distintivo características de una secuencia clonada por lo general se requiere antes de un nivel óptimo de expresión se encuentra
El nivel de expresión - genextraño depende también de la organismo huésped .
Actualmente , a pesar de una amplia gama de tanto procariotas como eucariotas
organismos pueden expresar genes extranjeros, muchos de los importantes comercialmente proteínas producidas por tecnología de ADN recombinante se sintetizan en Escherichia coli.
El uso extensivo de E. coli es comprensible a la luz del gran cantidad de investigación que seha llevado a cabo en su genética , molecular
la biología , la bioquímica y la fisiología . Por otra parte, las proteínas extrañas pueden por lo general ser producido por este organismo rápida y económicamente . Sin embargo, otros sistemas host , como Bacillus subtilis, levaduras , hongos y animales , las plantas, y células de insectos , se utilizan para expresar ciertos genes clonados. Sinembargo, el las estrategias que se han elaborado para E. coli , en principio, son aplicables a todos los sistemas Expresión Génica de promotores fuertes y regulables El requisito mínimo para un sistema de expresión génica eficaz es la presencia de una secuencia de promotor fuerte y regulable aguas arriba de una gen clonado .
Un promotor fuerte es uno que tiene alta afinidad por la ARN polimerasa ,
conla consecuencia de que la región aguas abajo adyacente es con frecuencia
transcrita. La capacidad de regular un promotor permite a la célula (y
el investigador ) para controlar la extensión de la transcripción de una manera precisa .
El promotor del operón lac bien estudiado (lactosa) de E. coli ha sido utilizado ampliamente para la expresión de genes clonados. Sin embargo, otros promotores tienenpropiedades distintivas que los hacen útiles para controlar la expresión .
Por lo tanto, muchos diferentes promotores han sido aislados de una gama de organismos. Podría parecer que una buena manera de optimizar la expresión de una clonado gen sería para insertarlo en un plásmido bajo el control de un continuamente activado promotor fuerte . Sin embargo , un alto nivel de continua
expresión de ungen clonado es a menudo perjudicial para la célula huésped porque crea una pérdida de energía , perjudicando de este modo las funciones esenciales de la célula huésped . en Además, todo o una porción del plásmido que lleva una forma continua (constitutivamente ) gen clonado expresado puede perderse después de varios ciclos de división , ya que las células sin plásmido crecen más rápido y,...
Expresión en procariotas
EL objetivo principal del gen clonación para aplicaciones biotecnológicas es la expresión del gen clonado en un organismo huésped seleccionado.
Desafortunadamente, la inserción de un gen en un vector de clonación no
garantiza necesariamente que va a ser expresado con éxito . Además, para
muchos propósitos comerciales, una altatasa de producción de la proteína
codificada por el gen clonado se requiere. En respuesta a la necesidad de un alto
tasa de expresión , se han creado muchos vectores de expresión especializados
que proporcionan elementos genéticos para controlar la transcripción , traducción,
estabilidad de la proteína , y la secreción del producto del gen clonado a partir de la célula huésped.
Las característicasbiológicas moleculares que han sido manipulados para
modular la expresión génica incluyen el promotor y terminador de la transcripción
secuencias, la fuerza del sitio de unión al ribosoma - , el número de copias del gen clonado y si el gen es el plásmido cargo o integrada en el genoma de la célula huésped, la localización celular final de la proteína extraña sintetizada, la eficiencia de latraducción en el huésped organismo, y la estabilidad intrínseca dentro de la célula huésped de la proteína codificada por el gen clonado.
No existe una estrategia única para la obtención de máxima expresión de cada gen clonado. Consideración del distintivo características de una secuencia clonada por lo general se requiere antes de un nivel óptimo de expresión se encuentra
El nivel de expresión - genextraño depende también de la organismo huésped .
Actualmente , a pesar de una amplia gama de tanto procariotas como eucariotas
organismos pueden expresar genes extranjeros, muchos de los importantes comercialmente proteínas producidas por tecnología de ADN recombinante se sintetizan en Escherichia coli.
El uso extensivo de E. coli es comprensible a la luz del gran cantidad de investigación que seha llevado a cabo en su genética , molecular
la biología , la bioquímica y la fisiología . Por otra parte, las proteínas extrañas pueden por lo general ser producido por este organismo rápida y económicamente . Sin embargo, otros sistemas host , como Bacillus subtilis, levaduras , hongos y animales , las plantas, y células de insectos , se utilizan para expresar ciertos genes clonados. Sinembargo, el las estrategias que se han elaborado para E. coli , en principio, son aplicables a todos los sistemas Expresión Génica de promotores fuertes y regulables El requisito mínimo para un sistema de expresión génica eficaz es la presencia de una secuencia de promotor fuerte y regulable aguas arriba de una gen clonado .
Un promotor fuerte es uno que tiene alta afinidad por la ARN polimerasa ,
conla consecuencia de que la región aguas abajo adyacente es con frecuencia
transcrita. La capacidad de regular un promotor permite a la célula (y
el investigador ) para controlar la extensión de la transcripción de una manera precisa .
El promotor del operón lac bien estudiado (lactosa) de E. coli ha sido utilizado ampliamente para la expresión de genes clonados. Sin embargo, otros promotores tienenpropiedades distintivas que los hacen útiles para controlar la expresión .
Por lo tanto, muchos diferentes promotores han sido aislados de una gama de organismos. Podría parecer que una buena manera de optimizar la expresión de una clonado gen sería para insertarlo en un plásmido bajo el control de un continuamente activado promotor fuerte . Sin embargo , un alto nivel de continua
expresión de ungen clonado es a menudo perjudicial para la célula huésped porque crea una pérdida de energía , perjudicando de este modo las funciones esenciales de la célula huésped . en Además, todo o una porción del plásmido que lleva una forma continua (constitutivamente ) gen clonado expresado puede perderse después de varios ciclos de división , ya que las células sin plásmido crecen más rápido y,...
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