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Práctico Nº 1: Osmolaridad - Tonicidad.

Introducción.

La mezcla de distintos elementos químicos ha permitido la creación de casi la totalidad de las cosas que observamos y utilizamos diariamente, ya sean plásticos, jabones, productos alimenticios etc. Una forma de mezclar es disolver una sustancia denominada soluto en otra denominada solvente, el solvente más común es elagua , que favorece la ocurrencia de una serie de reacciones. La dinámica de fluídos como el agua tiene muchas aplicaciones en Física , química y también en los organismos vivos cuyo peso corporal está constituido en gran medida por agua, la importancia biológica del agua yace en que en ésta ocurren muchas reacciones químicas de las que depende su metabolismo, crecimiento , y demás procesosbiológicos que involucran directa e indirectamente la continuidad de la vida, por ejemplo: transporte de nutrientes, oxígeno, el citoplasma de las células contiene agua por lo que todo lo que ocurra dentro de ella se lleva a cabo gracias al agua.
Es por eso que se hace necesario comprender y aplicar los conceptos de osmolaridad y tonicidad; entendiendo por el primero que es una unidad deconcentración que nos indica el número de osmoles por litro de solución, es una propiedad coligativa, lo que significa que depende del número de partículas dejando de lado otras cualidades; el concepto de tonicidad se refiere al comportamiento de una célula frente a diferentes soluciones de distinta osmolaridad.
Conceptos que son útiles de aplicar en el estudio de líquidos corporales como la sangre porejemplo cuando es sometida a cambios en su composición o a otros compuestos con diversas concentraciones de soluto o sustancia.










Objetivos.
Que el alumno comprenda y aplique el concepto de osmolaridad y tonicidad y proyecte a la aplicación clínica de soluciones parentales.

Sobre la base de cambios de volumen de eritrocitos, determinar la tonicidad de soluciones de NACl dediferentes concentraciones para llegar a establecer la osmolaridad del plasma sanguíneo.

Desplegar la capacidad para valorar y participar en trabajo de equipo.

Materiales.

Balanza.
Capilares para microhematocritos.
Gradillas.
Microcentrifuga.
Guantes desechables.
Heparina (5000 UI/ml).
Matraces.
Papel Nova.
Parafilm.
Pasta de sello para microhematocritos.
Pipetas automáticas(1000ul).
Puntillas para pipetas automáticas.
Tubos de ensayo (chicos).

Material de experimentación: Sangre humana.


Metodología.

Experimento 1

Soluciones: NaCl.-

Procedimiento: En primer lugar tomamos dos muestras de hematocrito con sangre total sin tratamiento. Este procedimiento se efectúa con guantes desechables, ya que trabajamos con sangre proveniente del hospital y podríamoscontagiarnos de alguna patología al no protegernos; se coloca el capilar en el tubo donde está contenida la sangre, ésta sube por capilaridad y cuando lleva tres cuartos del tubo se retira tapándose con el dedo índice el extremo del capilar, colocándose de inmediato en plasticina para sellar el capilar. Antes de efectuar el procedimiento descrito se debe homogenizar el tubo con sangre cuidadosamente,es importante no hacer la homogenización de manera brusca y rápida para evitar la destrucción de los glóbulos rojos.
En segundo lugar se agrega 1 ml de solución de NaCl de distinta concentración a 3 tubos de ensayos, luego se adjunta 1 ml de sangre a cada tubo, todo lo anterior utilizando pipetas automáticas. Homogenizar cuidadosamente; luego tomar una muestra de hematocrito a cada uno de lostubos, previamente marcados para su diferenciación, este procedimiento se efectúa de la misma forma descrita en el paso anterior.
En tercer lugar se llevan los cinco hematocritos a la centrífuga por 5 minutos.
En último lugar se lee el hematocrito, registrar resultados.



MUestra
NaCl


g/l
M
mM
OsM
mOsM
%Hto leído
Factor dilución
Hto corregido
Tonicidad
Tubo A
5.84
0.1...