Lic. Ciencias de la Educacion

AGROBIOTECNOLOGIA
CURSO 2013

Cultivo de tejidos vegetales I
María Mercedes Rivero

Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Universidad de Buenos Aires

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Sumario
Técnicas del cultivo de células y tejidos vegetales
Micropropagación vegetal
Consideraciones técnicas de la propagación
clonal masiva de plantas
Etapas delcultivo in vitro de plantas superiores
Vías morfogenéticas: organogénesis y embriogénesis

Sistemas de micropropagación vegetal
Aplicaciones biotecnológicas del cultivo de tejidos
Referencias
Cultivo de tejidos
vegetales

Técnicas del cultivo de células
y tejidos vegetales

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

Principales
conceptos
fisiológicos
aplicables
a loscultivos
in vitro

• Existen tres conceptos básicos que
fundamentan el cultivo in vitro de células
y tejidos vegetales:

- Totipotencialidad celular

- Desdiferenciación / Rediferenciación

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

- Balance de reguladores del crecimiento
vegetal

Fundamentos
teóricos y
prácticos
del cultivo
de tejidos
vegetales

• La teoría de latotipotencialidad celular, enunciada
por Haberlandt a principios del siglo XX, postula que toda
célula vegetal individual es capaz de regenerar una planta
entera a partir de un cultivo in vitro, sin importar el grado de
diferenciación alcanzado. Para ello se requieren condiciones
específicas referidas al medio del cultivo, relaciones
hormonales, temperatura, fotoperíodo, etc.
• Ladesdiferenciación consiste en la transformación y
pérdida de las características de especialización de un tipo
celular para dar lugar a células de tipo meristemático.
El siguiente paso involucrado en la regeneración de una
planta es la redifereciación de las células previamente
desdiferenciadas.

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

• Todo proceso de diferenciación está regulado por elbalance
entre diferentes tipos de reguladores del crecimiento,
fundamentalmente de auxinas y citocininas.

Técnicas
del cultivo
de células
y tejidos
vegetales

• Micropropagación vegetal

• Regeneración de plantas
(embriogénesis y organogénesis)
• Cultivo de meristemas
• Cultivo de suspensiones de células vegetales
• Cultivo de protoplastos
• Cultivo de anteras

• Cultivo deóvulos y embriones

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

Micropropagación vegetal

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

La micropropagación
constituye
la principal
aplicación
comercial
del cultivo
de tejidos
vegetales

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

• La micropropagación vegetal, o propagación clonal
masiva de plantas superiores,posibilita la obtención y
cultivo de plantas a gran escala.

• Se realiza bajo estrictas condiciones de esterilidad en
un medio sintético nutritivo y con control de temperatura,
luz y fotoperíodo.

Alcances
de la micropropagación
vegetal

• Propagación vegetativa rápida y a gran escala
• Uniformidad seleccionada del material clonado
• Multiplicación de plantas recalcitrantes
a lastécnicas convencionales
• Reducción en el tiempo de multiplicación
y en el espacio requerido para tal fin

• Mayor control sobre la sanidad del material
propagado
• Introducción rápida de nuevos cultivares
Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

• Conservación de germoplasma
• Facilidades para el intercambio internacional
de material vegetal

Consideraciones técnicas de lapropagación
clonal masiva de plantas

Agrobiotecnología
Cultivo de tejidos
vegetales

La micropropagación
requiere una
infraestructura
mínima
especializada
y condiciones
controladas
de cultivo

• Laboratorio
- Area de preparación de medios
- Area de lavado y esterilización
- Cuarto estéril
- Cámara de cultivo
- Area de rusticación

• Material vegetal
- Plantas madres...