Lic. En Nutrición
Páginas: 5 (1016 palabras)
Publicado: 8 de diciembre de 2012
Tinción de Gram
RESUMEN
Se realizo la tinción de Gram para E. coli y Staphylococcus aureus, para poder clasificar estas bacterias mediante esta técnica de tinción de diferenciación en Gram negativas y Gram positivas, resultando.
E. coli como una bacteria Gram – con una coloración rosa, con una morfología de bacilo flagelar, con un tamaño de 0.5 a 5 um aproximadamente.
Staphylococcusaureus como una bacteria Gram +, con una coloración violeta, en forma de cocos, y presenta una agrupación en forma de racimos estafilococos. Con un tamaño de 0.5 a 1.5 um aproximadamente.
INTRODUCCIÓN
La tinción de Gram desarrollada por el medico Danés Christian Gram en 1884, es el método de tinción mas utilizado en bacteriología, se trata de un método de tinción diferencial por que divide alas bacterias en dos grupos, las Gram negativas y la Gram positivas.
En el primer paso de esta tinción, el frotis se tiñe con colorante básico cristal violeta, el colorante primario, a continuación, se trata con una solución yodada que actúa como mordiente. Esto es, el yodo aumenta la interacción entre la célula y el colorante, de forma que aquella se tiñe más intensamente.
Luego sedecolora con etanol o acetona, este paso produce el aspecto diferencial de la tinción de Gram; las bacterias Gram+ retienen el cristal violeta, mientras que las Gram- lo pierden y aparecen incoloras. Finalmente se tiñe de nuevo con la tinción de contraste esta ves con safranina uno de los colorantes de contraste mas común y tiñe las bacterias Gram+ de color violeta y las Gram- de un tono rojo o rosa.OBJETIVOS
1. Diferenciar bacterias Gram positivas y Gram negativas
2. Comprobar las limitaciones que existen en la tinción cuando se utilizan cultivos bacterianos en fase estacionaria
3. Contribuir a manejarse con desenvoltura con el microscopio.
MATERIALES Y MÉTODOS
Bacterias:
-Portaobjetos con frotis bacterianos previamente preparados de:
a) Staphylococcus aureus.
b) Escherichiacolli
Colorantes:
a) Solución de cristal violeta al 1 %
b) Solución de safranina al 0.5 %
c) Solución diluida de yodo (lugol)
d) Alcohol-cetona (1:1)
Equipo:
- Microscopio y aceite de inmersión
Procedimiento (Figura 2):
1. Preparar frotis bacterianos con:
a) Staphylococcus aureus.
c) Escherichia coli.
2. Teñir con cristal violeta (1 min).
3. Lavar con abundante agua el exceso decolorante.
4. Cubrir con Lugol (1 min).
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona hasta que la preparación deje de perder color (unos 30 seg).
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teñir con safranina (1 min).
9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparación.
11. Examinar al microscopio.RESULTADOS Y DISCUSIONES
E. coli como una bacteria Gram – con una coloración rosa, con una morfología de bacilo flagelar, con un tamaño de 0.5 a 5 um aproximadamente.
Staphylococcus aureus como una bacteria Gram +, con una coloración violeta, en forma de cocos, y presenta una agrupación en forma de racimos estafilococos. Con un tamaño de 0.5 a 1.5 um aproximadamente.
Dos bacterias muydiferentes, pero con una característica en común, estas son los principales agentes causales de las gastroenteritis, ocasionada por la ingesta de alimentos contaminados con estos patógenos.
La E. coli tiene prevalencia por estar presente en alimentos cárnicos de origen vacuno primordialmente, recordemos que esta bacteria que se encuentra en el ganado de forma natural en su flora bacteriana, y solonos causa una intoxicación por el mal proceso de cocción de estos alimentos.
Por otro lado S. aureus que se encuentra presente en el aire, tiene mayor afectación por la contaminación de alimentos de origen láctico, como leches, cremas, pastelería y algunos productos cárnicos como embutidos.
Bacteria | Morfología/Tipo de agrupación | Gram positiva/Gram negativa |
Staphylococcus aureus | |...
RESUMEN
Se realizo la tinción de Gram para E. coli y Staphylococcus aureus, para poder clasificar estas bacterias mediante esta técnica de tinción de diferenciación en Gram negativas y Gram positivas, resultando.
E. coli como una bacteria Gram – con una coloración rosa, con una morfología de bacilo flagelar, con un tamaño de 0.5 a 5 um aproximadamente.
Staphylococcusaureus como una bacteria Gram +, con una coloración violeta, en forma de cocos, y presenta una agrupación en forma de racimos estafilococos. Con un tamaño de 0.5 a 1.5 um aproximadamente.
INTRODUCCIÓN
La tinción de Gram desarrollada por el medico Danés Christian Gram en 1884, es el método de tinción mas utilizado en bacteriología, se trata de un método de tinción diferencial por que divide alas bacterias en dos grupos, las Gram negativas y la Gram positivas.
En el primer paso de esta tinción, el frotis se tiñe con colorante básico cristal violeta, el colorante primario, a continuación, se trata con una solución yodada que actúa como mordiente. Esto es, el yodo aumenta la interacción entre la célula y el colorante, de forma que aquella se tiñe más intensamente.
Luego sedecolora con etanol o acetona, este paso produce el aspecto diferencial de la tinción de Gram; las bacterias Gram+ retienen el cristal violeta, mientras que las Gram- lo pierden y aparecen incoloras. Finalmente se tiñe de nuevo con la tinción de contraste esta ves con safranina uno de los colorantes de contraste mas común y tiñe las bacterias Gram+ de color violeta y las Gram- de un tono rojo o rosa.OBJETIVOS
1. Diferenciar bacterias Gram positivas y Gram negativas
2. Comprobar las limitaciones que existen en la tinción cuando se utilizan cultivos bacterianos en fase estacionaria
3. Contribuir a manejarse con desenvoltura con el microscopio.
MATERIALES Y MÉTODOS
Bacterias:
-Portaobjetos con frotis bacterianos previamente preparados de:
a) Staphylococcus aureus.
b) Escherichiacolli
Colorantes:
a) Solución de cristal violeta al 1 %
b) Solución de safranina al 0.5 %
c) Solución diluida de yodo (lugol)
d) Alcohol-cetona (1:1)
Equipo:
- Microscopio y aceite de inmersión
Procedimiento (Figura 2):
1. Preparar frotis bacterianos con:
a) Staphylococcus aureus.
c) Escherichia coli.
2. Teñir con cristal violeta (1 min).
3. Lavar con abundante agua el exceso decolorante.
4. Cubrir con Lugol (1 min).
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona hasta que la preparación deje de perder color (unos 30 seg).
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teñir con safranina (1 min).
9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparación.
11. Examinar al microscopio.RESULTADOS Y DISCUSIONES
E. coli como una bacteria Gram – con una coloración rosa, con una morfología de bacilo flagelar, con un tamaño de 0.5 a 5 um aproximadamente.
Staphylococcus aureus como una bacteria Gram +, con una coloración violeta, en forma de cocos, y presenta una agrupación en forma de racimos estafilococos. Con un tamaño de 0.5 a 1.5 um aproximadamente.
Dos bacterias muydiferentes, pero con una característica en común, estas son los principales agentes causales de las gastroenteritis, ocasionada por la ingesta de alimentos contaminados con estos patógenos.
La E. coli tiene prevalencia por estar presente en alimentos cárnicos de origen vacuno primordialmente, recordemos que esta bacteria que se encuentra en el ganado de forma natural en su flora bacteriana, y solonos causa una intoxicación por el mal proceso de cocción de estos alimentos.
Por otro lado S. aureus que se encuentra presente en el aire, tiene mayor afectación por la contaminación de alimentos de origen láctico, como leches, cremas, pastelería y algunos productos cárnicos como embutidos.
Bacteria | Morfología/Tipo de agrupación | Gram positiva/Gram negativa |
Staphylococcus aureus | |...
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