Linfomas
FACULTAD DE MEDICINA
LINFOMAS NO – HODGKIN ASOCIADOS AL SIDA:
ESTUDIO CLÍNICO, MORFOLÓGICO,
INMUNOHISTOQUÍMICO Y MOLECULAR: PAPEL
ETIOLÓGICO DEL VIRUS DE EPSTEIN - BARR
MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR
PRESENTADA POR
Alejandro Pascual Martín
Bajo la dirección del doctor
Carmen Bellas Menéndez
Madrid, 2001
ISBN: 84-669-2075-7
UNIVERSIDAD COMPLUTENSEDE MADRID
FACULTAD DE MEDICINA
LINFOMAS NO-HODGKIN ASOCIADOS AL SIDA
ESTUDIO CLÍNICO, MORFOLÓGICO,
INMUNOHISTOQUÍMICO Y MOLECULAR. PAPEL
ETIOLÓGICO DEL VIRUS DE EPSTEIN-BARR.
ALEJANDRO PASCUAL MARTÍN
TESIS DOCTORAL
MADRID 2000
1
AGRADECIMIENTOS.......................................................................................9ABREVIATURAS..............................................................................................11
1. INTRODUCCIÓN........................................................................................15
1.1. LNH ASOCIADOS AL SIDA.................................................................16
1.1.1. Epidemiología........................................................................16
1.1.2.Clasificación...........................................................................18
1.1.3. Características histológicas....................................................20
1.1.4. Características clínicas...........................................................23
1.1.5. Inmunofenotipo......................................................................25
1.1.6. Genotipomolecular...............................................................27
1.1.6.1. C-MYC...................................................................27
1.1.6.2. BCL-6.....................................................................29
1.1.6.3. P53..........................................................................34
1.1.6.4. BCL-2.....................................................................36
1.1.7. Papel de la hiperestimulaciónantigénica en el desarrollo
de linfomas en los pacientes infectados por el VIH...............37
2
1.2. ELVIRUS DE EPSTEIN-BARR........................................................40
1.2.1. Característica estructurales....................................................41
1.2.2. Transmisión............................................................................45
1.2.3.Latencia..................................................................................45
1.2.4. Métodos de detección............................................................52
1.3. EL VEB y LOS LNH ASOCIADOS AL SIDA.................................54
2.OBJETIVOS....................................................................................................58
3.MATERIALES YMÉTODOS......................................................................62
3.1. MATERIAL........................................................................................63
3.2. CLASIFICACIÓN Y ESTUDIO MORFOLÓGICO..........................63
3.3. ESTUDIO INMUNOHISTOQUÍMICO.............................................66
3.3.1. Técnicas inmunohistoquímicas..............................................66
3.3.2.Controles................................................................................69
3.3.3. Cuantificación de los resultados de las tinciones
inmunohistoquímicas...........................................................70
3
3.4. TÉCNICAS MOLECULARES...........................................................72
3.4.1. Técnica de hibridación “in situ” para EBERs........................723.4.2. Técnica de PCR......................................................................72
3.4.2.1. Métodos de extracción del ADN..............................73
3.4.2.2. Amplificación mediante la técnica de PCR..............75
3.4.2.3. Visualización de los productos de la PCR................77
3.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO................................................................78
4....
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