Lipidos

EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN

El contenido total de lípidos se determina comúnmente por métodos de extracción con disolventes orgánicos (por ejemplo Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo también puede cuantificarse por métodos de extracción que no incluyen disolventes (por ejemplo, Babcock, Gerber) y por métodos instrumentales que se basan en propiedades físicas o químicas de los lípidos(por ejemplo, infrarrojo, densidad y absorción es rayos X)


• Método de Soxhlet
• Método de Goldfish
• Método de Röse-Gottlieb
• Método de Gerber.
• Método de Mojonnier


Método de Soxhlet
Es una extracción semicontinua con un disolvente orgánico. En este método el disolvente se calienta, se volatiliza y condensa goteando sobre la muestra la cual queda sumergida en eldisolvente. Posteriormente éste es sifoneado al matraz de calentamiento para empezar de nuevo el proceso. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso
Procedimiento: Colocar a peso constante un matraz bola de fondo plano con perlas o piedras de ebullición en la estufa a 100ºC, aproximadamente 2 hrs.
Pesar de 4 a 5 g de muestra sobre un papel, enrollarlo y colocarlo en un cartuchode celulosa, tapar con un algodón (No apretar el algodón contra la muestra) y colocar el cartucho en el extractor.
Conectar el matraz al extractor, en el que se debe encontrar el cartucho con la muestra, y posteriormente conectar éste al refrigerante. (No poner grasa en las juntas). Agregar dos cargas del disolvente (generalmente éter etílico) por el refrigerante y calentar el matraz conparrilla a ebullición suave. Para verificar que se ha extraído toda la grasa, dejar caer una gota de la descarga sobre papel filtro, al evaporarse el disolvente no debe dejar residuo de grasa.
Una vez extraída toda la grasa, quitar el cartucho con la muestra desengrasada, seguir calentando hasta la casi total eliminación del disolvente, recuperándolo antes de que se descargue. Quitar el matraz y secarel extracto en la estufa a 100ºC por 30 min., enfriar y pesar.
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Método de Goldfish
Es una extracción continua con un disolvente orgánico. Éste se calienta, volatiliza para posteriormente condensarse sobre la muestra. El disolvente gotea continuamente a través de la muestra para extraer la grasa. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso entre la muestra o la grasaremovida.
Procedimiento:Colocar un vaso para Goldfish en la estufa a 100ºC hasta peso constante, aproximadamente 2 hrs.
Pesar de 4 a 5 g de muestra sobre un papel, enrollarlo y colocarlo en un cartucho de celulosa, tapar con un algodón. Situar el cartucho en un recipiente con el fondo perforado y colocarlo en el sostenedor del equipo.
Adicionar en el vaso para Goldfish aproximadamente 40 mL deldisolvente (éter etílico) y colocarlo en el equipo mediante un anillo de hierro con empaque de hule. Subir la parrilla girando hacia un lado y al contrario. Calentar hasta la extracción completa de la
grasa. Para verificar que se ha extraído toda la grasa, dejar caer una gota de la descarga sobre papel filtro, al evaporarse el disolvente no debe dejar residuo de grasa
Al finalizar, cambiar elsostenedor del cartucho por un recipiente sin perforación y calentar de nuevo para recuperar el disolvente del vaso.
Quitar el vaso del equipo y secar el extracto en una estufa a 100ºC por 30 min., enfriar y pesar.
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Método Mojonnier
La grasa es extraída con una mezcla de éter etílico y éter de petróleo en un matraz de Mojonnier, la grasa extraída se pone a peso constante y es expresada enporcentaje de grasa por peso. La prueba de Mojonnier es un ejemplo de extracción discontinua con disolvente. Esta extracción no requiere remover previamente la humedad de la muestra.
Procedimiento: Pesar 10g de muestra y colocarla en el tubo de extracción Mojonnier Adicionar 1 mL de hidróxido de amonio 0.88 y mezclar. Adicionar 10 mL de etanol, mezclar y enfriar.
Adicionar 25 mL de éter etílico,...