Lippincott Cp 20 Medicion De Las Funciones Inmunitarias

Medición de
las funciones
inmunitarias
1. GENERALIDADES
Los iaboratorlos clínicos proveen un gran número de procedimientos analíticos que representan la base de la medicina moderna. Muchos de los
procedimientos de los análisis habituales están basados en el uso de anticuerpos. Estos análisis se benefician de la capacidad de los anticuerpos
de agregar (aglutinación) antígenos particulados (p. ej.,durante la tipificación de los grupos sanguíneos) o precipitar antígenos solubles (p. ej.,
la inmunodifusión radial, la inmunodifusión de Ouchterlony o doble y la
inmunoelectroforesis). Otros análisiss están basados en la utilización de
anticuerpos modificados que permiten cuantificar los antígenos de forma
muy sensible y específica (p. ej., los radioinmunoanálisis y los inmunoanálisis deadsorción). Otros (p. ej., la inmunofluorescencia y la citometría de
flujo) utilizan anticúerpos marcados con un fluorocromo para determinar la
expresión antigénica tanto dentro como en la superficie de las células. La
función inmunitaria se puede medir tanto en el laboratorio (p. ej., la fijación
de complemento, la proliferación y la citotoxicidad de los linfocitos 1) como
en el entorno clínico (ladeterminación de la hipersensibilidad). La variedad
de las pruebas clínicas basadas en las respuestas inmunitarias está lejos
del objetivo de este libro; en cambio, se ofrecen algunos ejemplos de los
procedimientos de análisis que se utilizan más habitualmente.

11. DETECCiÓN

DE EPíTOPOS MEDIANTE ANTICUERPOS

Muchos de los análisis clínicos del laboratorio están basados en la especificidad de losanticuerpos contra el antígeno y de su capacidad de reconocer epítopos, que son una pequeña parte de los antígenos. Los análisis basados en anticuerpos utilizan los epítopos como herramientas y la
mayoría se basan en una curva de precipitación cuantitativa (fig. 20-1,
v. también fig. 11-2).
A. Antígenos

particulados

Los antígenos particulados, como los eritrocitos, las bacterias o incluso las bolasde látex recubiertas de antígenos, cuando están en suspensión normalmente se encuentran dispersos de forma uniforme. Los
anticuerpos provocan el entrecruzamiento de las partículas portadoras
de antígenos y rompen la homogeneidad de la suspensión. Este entrecruzamiento ocasiona la agregación de las partículas, lo que también se conoce como aglutinación (fig. 20-2). La reacción recibe distintasdenominaciones según si el antígeno particulado es un eritrocito
(hemaglutinación), si los anticuerpos IgM entrecruzan eficazmente las
partículas (aglutinación directa), o si se utiliza una antiinmunoglobulina
para entrecruzar los anticuerpos unidos a antígenos (aglutinación indirecta o pasiva).

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20. Medición de las funciones inmunitarias

Figura 20-1

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Curva cuantitativa deprecipitación. Preparación del anticuerpo: se prepara
una dilución seriada de un suero que contiene anticuerpos,de manera que
cada dilución contiene "la mitad» de la concentración de anticuerpos que la
anterior (expresadás como 1:2, 1:4, 1:8, etc.). Reacción antígeno-anticuerpo:
a las diluciones de anticuerpo se les añade una concentración fija de antígeno
(que contiene múltiples epítopos),lo que resulta endiferentes grados de
formación de complejos antiqeno-anticuerpo. Reacción con antígenos
solubles: se forman complejos antígeno-anticuerpo en tres zonas. En la zóna
de equivalencia, tantoel antígeno como el anticuerpo están en.concentraciones
que originan la formación de una red, lo que provoca la precipitación de los
complejos antígeno-anticuerpo. En la zona de exceso de anticuerpo las
moléculas deanticuerpo están en exceso 'en comparación con el número de
epítopos y no se forman complejos precípítantes.ya que no se genera una red
de suficiente envergadura. En la zona de exceso de antígeno el número de
epítopos sobrepasa los sitios de unión de los anticuerpos y los complejos no
precipitan porque no se forma una red suficiente ..Reacción con antígenos
particulados: el máximo coágulo o...