lizosima

Purificación de la lisozima de clara de huevo
Objetivos: 1 - Separación de la proteína lisozima de la clara de huevo mediante cromatografía
de intercambioiónico.
2- Detección de la lisozima, obtenida mediante cromatografía iónica,
por medio de una electroforesis en geles de poliacrilamida en condicionesdesnaturalizantes (PAGE-SDS).

Muestra: clara de huevo

Métodos: 1-Intercambio iónico2-Electroforesis

Resultados
Intercambio iónico:
Fracción
Dilución
Vol(ml)
UA280/ml
UA280 TOTALES
F0
1/50
4.0
0.326
65.2
F1
1/50
4.0
0.261
52.2
L1
1/5
4.0
0.471
9.42
L2

4.00.382
1.528
L3

4.0
0.084
0.336
L4

4.0
0.029
0.116
E1

2.0
0.017
0.034
E2

2.0
0.003
0.006
E3

2.0
0.237
0.474
E4
1/3
2.0
0.440
2.64
E5

2.0
0.247
0.494

FO:Muestra( clara de huevo)
F1: Percolado
L: Lavados
E: EluÍdos
% Proteínas recuperadas =∑UA280TOTALES(F1+LI+EI) x100 = 67,248X100 =103 %UA280TOTALF0 65,2
%Lisozimas recuperadas= ∑UA280TOTALESEI X100 =3,648X100 = 6%
UA280TOTAL F0 65,2Electroforesis:
F0 F1 E ST

ST(estándar de lisozima)
Observaciones:
No fue posible visualizar correctamente en el gel las bandas correspondientes a cada una de nuestra siembra, es por estoque para nuestra conclusión nos basaremos en los datos obtenidos en años anteriores.
Discusión:
Con respecto al intercambio ionico realizado, obtuvimos un %de recuperación de proteínas mayor al100%, a este aumento le podemos asociar la aproximación que estamos haciendo en decir que la absorbancia(a 280nm) medida equivale a la concentración (mg/ml) de proteínas en la muestra.
Además...