lo mejo dde las enzimas

1) Nombre de la prueba de laboratorio

Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos

2) Fecha de elaboración y nombre de quien lo hace

Elaborado por:Isac Orlando Paguada Méndez 03 de junio de 2014

3) Principio de la prueba:

Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. El indicador es quinoneimina formadaa partir de peróxido de hidrogeno. 4-aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Principio de la reacción:
Triglicéridos lipasas glicerol + ácidosgrasos
Glicerol + ATP GK glicerol-3-fosfato + ADP
Glycerol-3-fosfato GPO fosfato dihidroxiacetona +H2O2
H2O2 + 4-aminoanntipirina POD quinoneimina + HCL +H2O + 4clorofenol
4) Método:

GPO-PAP

5) Materiales:

Muestra del paciente
RGT monoreactivo
Buffer PIPES
4-clorofenol
4-aminofenasona
Iones de magnesio
ATP
Lipasas
PeroxidasaGlicerol quinasa
Glicerol 3-fosfato oxidasa solución estándar

6) Equipos:

Pipetas
Micro pipetas
Espectrofotómetro
Perilla
Cubetas
Tubos de ensayos
Agitadores
Incubadora
Termómetro7) Reactivos:

A. Reactivo A: viales conteniendo lipoproteina lipasa, glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona(4-AF).
B. Reactivo B: solución de buffer Good conteniendo clorofenol, pH 7,5.S. Standard: solución de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a 2 g/l de trioleína).

8) PROCEDIMIENTO
Atemperar el Reactivo atemperatura ambiente.

2. Pipetear en tubos de ensayo
3. Agitar bien e incubar los tubos durante 15 minutos a temperatura ambiente (16-25ºC) o durante 5 minutos a 37ºC.

4. Leer la absorbancia (A)del Patrón y de la Muestra a 500 nm frente al Blanco. El color es estable durante al menos 2 horas.


MUESTRAS
Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estándar.
Los triglicéridos en...