Localización de factor tisular en dominios ricos en colesterol (lipid rafts)

LOCALIZACIÓN DE FACTOR TISULAR (FT) EN DOMINIOS RICOS EN COLESTEROL (LIPID RAFTS, LR): MECANISMO DE ENCRIPTACIÓN DE ACTIVIDAD PROCOAGULANTE EN PLAQUETAS HUMANAS (TissueFactor (TF) localization in cholesterol-rich domains (Lipid Rafts, LR): Mechanism of procoagulant activity encryption in human platelets) Ibarra P., Panes O., Matus V., Sáez CG,Pereira J., Mezzano D. Dpto. Hematología-Oncología, Escuela de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile. pcibarra@uc.cl (Patrocinio: E. Brandan) Introducción. Lasplaquetas contienen, sintetizan y expresan FT funcional, especialmente al ser activadas. El FT debe estar protegido (“encriptado”) por algún mecanismo post-traduccional paramantenerlo inactivo en la membrana plaquetaria. Este estudio pretende indagar si la localización de FT en LR, es un mecanismo de encriptación de su actividad procoagulante.Metodología: Se preparó LR de plaquetas humanas lisadas en Triton X-100 a 4ºC y sometidas a ultra centrifugación (180.000g x 18 hrs, 4ºC) en gradiente continua de sacarosa (5 a40%). Se extrajeron 12 fracciones identificando los LR por western blots, usando flotilina-1 como marcador y MoAb que reconoce la forma inactiva del FT. Resultados: LR deplaquetas en reposo contienen 18% de la especie de 60 kDa de FT plaquetario inactivo, estimado por densitometría. Esta fracción aumenta a 25% post-activación inicial de lasplaquetas (5 min) y a 45% (15 min) de activación con TRAP (5μM). El peso molecular obtenido, sugiere que LR favorecen la dimerización del FT. Conclusiones: El desplazamiento deFT hacia LR constituiría un mecanismo de encriptación e inhibición de su actividad procoagulante en plaquetas humanas.

Financiamiento FONDECYT1060637, DIPUC-17.