Los 7 Ensayos De La Realidad Peruana

BOTANICA
Acta Científica Venezolana, 55: 211-217, 2004

EFECTO DEL HERBICIDA GLUFOSINATO DE AMONIO EN DIFERENTES EXPLANTES DE Coffea arabica cv. Catimor
Rafael Fernandez Da Silva y Andrea Menéndez Yuffá Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Instituto de Biología Experimental. Postgrado en Botánica. Laboratorio de Clonación y Genética Vegetal. Apartado 47114, Los Chaguaramos,Caracas 1041, Venezuela 1 2 e-mail: rafaelfer@telcel.net.ve , amenendez@cantv.net
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Recibido: 30/03/04; Revisado: 20/06/04; Aceptado: 15/12/04
RESUMEN: Se evaluó la sensibilidad de distintos explantes (callo embriogénico, secciones foliares, embriones somáticos en estadio torpedo y células en suspensión) de Coffea arabica cv. Catimor al herbicida glufosinato de amonio (0,5; 1; 5 y 10mg/L), con el fin de conocer la concentración óptima a utilizar de este agente selectivo en subsiguientes experimentos de transformación genética. Se determinó que, tanto en explantes foliares como en callo y en embriones somáticos, la inhibición del crecimiento se produce a partir de 1 mg/L del herbicida. Las células en suspensión presentaron una mayor resistencia al agente de selección, ya que laconcentración inhibitoria del crecimiento fue de 5 mg/L. Palabras clave: café, callo embriogénico, embriones somáticos, células en suspensión, glufosinato de amonio.

EFFECT OF THE HERBICIDE GLUFOSINATE AMMONIUM IN EXPLANTS OF Coffea arabica cv. Catimor
ABSTRACT: The sensitivity of different explants (embryogenic calli, leaf sections, somatic embryos in torpedo stage and cell suspensions) ofCoffea arabica cv. Catimor to the herbicide glufosinate ammonium (0.5; 1; 5 y 10 mg/L) was determined. This will allow the establishment of optimal concentrations to be used in further genetic transformation experiments, using the gene bar as the selection marker. Growth of leaf sections, calli and somatic embryos was inhibited by 1 mg/L of the herbicide. Suspension-growing cells showed greaterresistance to this selection agent, showing growth inhibition at glufosinate concentrations of 5 mg/L and higher. Key Words: Coffee, embryogenic callus, somatic embryos, cell suspensions, glufosinate ammonium.

INTRODUCCION El café (Coffea arabica L.) es un cultivo de gran importancia económica en el mundo, evidenciado por los millones de dólares que obtienen algunos países productores de Centro y SurAmérica, Africa y Asia11. Esta planta pertenece a la familia Rubiaceae y la especie más cultivada en Venezuela y en el mundo es Coffea arabica L. El mejoramiento genético de esta planta puede abordarse tanto por métodos convencionales como biotecnológicos. Entre estos últimos se encuentra la ingeniería genética, que permite la incorporación de material genético foráneo específico a las plantas. Elestablecimiento de un sistema de transformación eficiente requiere de la disponibilidad de un explante competente para el proceso de transformación, un sistema de cultivo que permita una alta frecuencia de regeneración y un sistema de transferencia génico sencillo, exitoso, económico, reproducible, independiente del genotipo, y que inserte de manera estable la secuencia transgénica2.

En elcafé, los métodos de cultivo de tejidos están bien establecidos en las diversas especies y para los diferentes órganos excepto la raíz1. El sistema más eficiente es la inducción de embriogénesis somática a partir de secciones de hoja. El establecimiento de un sistema de transformación genética requiere que la construcción genética a introducir tenga genes marcadores que permitan la selección de lostejidos transformados. El gen bar confiere resistencia al herbicida glufosinato de amonio y ha sido utilizado como gen de selección para la transformación genética de plantas. El Bialaphos y la fosfinotricina (PPT) son potentes herbicidas. El Bialaphos es un antibiótico tripéptido producido por Streptomyces hygroscopicus. Consiste de L-PPT (también conocido como glufosinato de amonio), un análogo...