Lowry

Prácticas Bioquímica
Facultad de Medicina

DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN
DE PROTEÍNAS:
MÉTODO DE LOWRY

2010-2011

Determinar la concentración de proteínas en una muestra biológica esuna técnica de rutina básica cuando se aborda un esquema de purificación de
una proteína concreta, cuando se quiere conocer la actividad específica de una
preparación enzimática, para eldiagnóstico de enfermedades, así como para
otros muchos propósitos.
Existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas. Muchos de estos
métodos se basan en:
a) la propiedad intrínseca de lasproteínas para absorber luz en el UV.
b) para la formación de derivados químicos.
c) la capacidad que tienen las proteínas de unir ciertos colorantes.

Método de Lowry.
El método de Lowry1 es unmétodo colorimétrico de valoración cuantitativa
de las proteínas. A la muestra se le añade un reactivo que forma un complejo
coloreado con las proteínas, siendo la intensidad de color proporcionala la
concentración de proteínas, según la ley de Lambert-Beer.
1) Los iones Cu2+, se unen a las proteínas formando complejos con los átomos de
nitrógeno de los enlaces peptídicos. Estos complejosCu2+ proteína tienen un color
azul claro. Además, provocan el desdoblamiento de la estructura tridimensional de
la proteína, exponiéndose los residuos fenólicos de tirosina que van a participar enla segunda etapa de la reacción.
2) Se lleva acabo la reducción del reactivo de Folin-Ciocalteau, por los grupos
fenólicos de los residuos de tirosina presentes en la mayoría de las proteínas,actuando el cobre como catalizador. El principal constituyente del reactivo de
Folin-Ciocalteau es el ácido fosfomolibdotúngstico, de color amarillo, que al ser
reducido por los grupos fenólicos dalugar a un complejo de color azul intenso.

1

Lowry OH et al. Protein measurement with the Folin phenol reagent J Biol Chem. 1951 Nov;193(1):265-75.
http://www.jbc.org/content/193/1/265.long...