Lowry

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS POR EL MÉTODO DE LOWRY
Datos Experimentales
* Curva tipo
CUERVA DE CALIBRACIÓN |
TUBO N° | CANTIDAD DE PROTEINA(μg) | A730 | SERIE SUJETADA POR REGRESIÓN LINEAL |
| | SERIA A | SERIE B | |
1 | 25 | 0.095 | 0.095 | y = 0.0028x + 0.0182 R² = 0.9947 |
2 | 50 | 0.147 | 0.158 | y = 0.0028x + 0.0182 R² = 0.9947 |
3 | 75 | 0.226 | 0.232 | y = 0.0028x +0.0182 R² = 0.9947 |
4 | 100 | 0.31 | 0.303 | y = 0.0028x + 0.0182 R² = 0.9947 |
5 | 125 | 0.363 | 0.383 | y = 0.0028x + 0.0182vR² = 0.9947 |
Tabla.1 Lecturas de absorbancia de albumina para la realización de la curva tipo.
Fig. 1 Curva tipo de albumina.

Cuestionario
1.- Calcule y escriba los valores de la pendiente, ordenada al origen, y el coeficiente de correlación, digacómo se interpreta para la curva de calibración.
R= y= mx+b y = 0.0028x + 0.0182 R² = 0.9947. La curva tipo es una representación grafica, de un método instrumental, que relaciona la medida o señal instrumental, como variable dependiente en las ordenadas y la concentración del analito como variable independiente en las abscisas, que con ayuda de esta grafica podemos determinar de manera rápiday confiable la concentración o parámetro medido por la curva.
2.- ¿Cumple su curva la Ley de Bouguer y Beer? ¿Entre que limites de cantidad de proteína?
R= Lowry si obedece la ley ya que los valores de los límites nos indican donde es debe considerarse una interferencia como positiva o negativa según sea. Es por eso que en la práctica se hace un análisis estadístico para conocer elvalor de los límites y de tal manera relacionarnos con la cantidad de proteína.
3.- A partir de la ecuación de la recta ajustada por regresión lineal. Calcule el factor de calibración de la curva. ¿Cuál es la importancia de éste y para qué se utiliza?
R= El factor de calibración o también llamado curva de calibración es una línea determinada por la información de respuesta de calibración de uninstrumento. Función matemática producida por la regresión de las respuestas del detector registradas durante la calibración de un instrumento. La función describe las respuestas del detector a lo largo de un rango de concentraciones y es utilizada para predecir la concentración de una muestra desconocida, basándose en la respuesta del detector.

Tubo No. | Absorbancia (730 nm) | Cantidad deproteína (μg) |
1 | 0.243 | 80.3 |
2 | 0.246 | 81.4 |
3 | 0.242 | 79.9 |
4 | 0.236 | 77.8 |
5 | 0.235 | 77.4 |
6 | 0.24 | 79.2 |
7 | 0.247 | 81.7 |
8 | 0.245 | 81.0 |
9 | 0.255 | 84.6 |
10 | 0.196 | 63.5 |
 Análisis estadístico  |
x | Media | 78.7 |
S | Desviación estándar | 5.7 |
S2 | Varianza | 32.63 |
Cv | Coeficiente de variación | 7.3 |
%E | Porcentaje de error | 4.9|
LCMS | Límite de confianza superior | 82.8 |
LCMI | Límite de confianza inferior | 74.6 |
* Análisis estadísticos

Tabla.2 Repetición del tubo número 3 para el Análisis Estadístico
Cálculos
Media = x = n1 + n2 + n3 + nx n=(80.3+81.4+79.9+77.8+77.4+79.2+81.7+81+84.6+63.5)/10=78.7
Desviación estándar = S = 5.6 (Calculadora x ∂ n – 1)
Varianza = S2 = (5.7)2=32.63
Coeficiente de variación = (S÷ x ) ×100 = (5.778.7)/100= 7.3

% de Error = Valor observado-Valor esperado÷Valor esperado×10
= (78.7 – 75)/75 x 100= 4.9
Límite de confianza de la media = x ± t S / √n
Limite confiable de la media superior= 78.7 +( (2.262x5.7)/√10)=82.8
Limiteconfiable de le media inferior= 78.7 - ( (2.262x5.7)/√10)= 74.6

* Efecto de algunas sustancias no proteicas que pueden inferir en el desarrollo de color.
Limite confiable de la media superior= 82.8 Limite confiable de le media inferior= 74.6
Tubo No. | Sustancia | A 730 nm | Proteína (µg) | Tipo de interferencia |
1 | Tris 1 M, pH 7.0 | 0.339 | 114.57 | Positiva |
2 | Glicerol...