Luminol
Development of latent stains: effectiveness of luminol and evaluation of its effect on DNA analysis.
A. Castelló Ponce, M. Álvarez Seguí , M. Miquel Feucht! y F.A. Verdú Pascual"
RESUMEN Con frecuencia, las ropas manchadas de sangre durante un acto violento son lavadas para tratar deeliminar los vestigios. El análisis del DNA mediante PCR ha dotado a la criminalística de la posibilidad de estudiar indicios mínimos que, con otros métodos, sería imposible analizar. Este tipo de muestra plantea una mayor dificultad en la detección de la mancha. En el presente trabajo se analiza la sensibilidad del luminol para encontrar manchas de sangre invisibles. Sobre estas manchas se intentaextraer y amplificar DNA. Los resultados indican que el luminol es muy eficaz para detectar indicios invisibles. Además, en las condiciones experimentales con las que se ha elaborado este trabajo, no se produce interferencia del reactivo en la posterior extracción y amplificación del DNA. ABSTRACT Frequently, clothes stained with blood during a violent act are washed to try to eliminate the traces.The analysis of DNA by means of PCR has provided criminalistics with the possibility of studying minimum traces which would be impossible to analyse by other methods. Detection of the stain is extremely difficult in this type of sample. The present paper examines the sensitivity of luminol for finding invisible blood stains, and an attempt is made to extract and amplify DNA from them. The resultsshow that luminol is very efficient for the detection of invisible stains. In the experimental conditions used in this work, the reagent does not interfere in the posterior extraction and amplification of DNA.
Palabras clave: criminalística, luminol, manchas de sangre invisibles, DNA.
Key words: criminalistics, luminol, latent bloodstains, DNA.
Correspondencia: Fernando A. Verdú. U.D.Medicina Legal. Facultat de Medicina i Odontología. Universitat de Valencia EG Av/ Blasco Ibañez, 17. 46010 Valencia. Telefono: 963 864 165 / 820. Fax: 963 864 165. Correo electrónico: fevepa@uv.es 1 Doctora en Ciencias Químicas. 2 Doctora en Medicina. Profesora Asociada de Medicina Legal y Forense. 3 Licenciado en Medicina. Profesor colaborador de Medicina Legal y Forense. 4 Profesor Titular deMedicina Legal y Forense.
Fecha de recepción: 28.NOV.01
Fecha de aceptación: 31.MAY.02
Cuadernos de Medicina Forense Nº 28 - Abril 2002
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Revelado de manchas latentes: efectividad del luminol y evaluación de su efecto sobre el estudio del DNA.
MATERIAL Y MÉTODO: Material y Reactivos: - Luminol (3 aminophthalhydrazide). - Perborato de Sodio. - Carbonato de Sodio. - Agua destilada. -Material de vidrio para medida de volúmenes. Refrigerador. Balanza analítica. - Material y reactivos necesarios para extracción con Chelex 100. - Material y reactivos para amplificación (locus D1S80). - Material y reactivos necesarios para electroforesis en gel de agarosa y visualización de resultados. Método: 1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA: Obtener sangre por punción venosa (como anticoagulanteutilizar EDTA). Sobre una tela de algodón formar 20 manchas de sangre y dejar que se sequen a temperatura ambiente. Cada mancha contiene 10 gotas de sangre. 2.- PROCEDIMIENTO: La tela manchada se ha lavado en la lavadora. Se ha elegido una temperatura de lavado de 30ºC y se ha utilizado un detergente y un suavizante standard. Tras el lavado se ha dejado secar al aire libre. Después se eligen lasmuestras como se indica a continuación:
INTRODUCCIÓN: Con mucha frecuencia las personas implicadas en una acción criminal intentan hacer desaparecer cualquier indicio que puede ser utilizado como prueba de su participación en el mismo. Afortunadamente, el análisis de DNA mediante PCR ha proporcionado a la Criminalística la posibilidad de estudiar indicios mínimos que de otra forma sería...
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