métodos de tincion de bacterias

Métodos de tinción de bacterias
Tinción GRAM: Morfología Bacteriana
La tinción de GRAM aporta dos ideas básicas para la definición "taxonómica" de las bacterias: el color que adquieren tras la tinción y la forma que presentan las células bacterianas.
En lo relativo a la coloración, ya hemos explicado anteriormente que hablamos de microorganismos Gram-positivos cuando aparecen teñidos de colorazul-violeta y de Gram negativos cuando se visualizan de color rojo-rosado.
Formas básicas en que se puede visualizar la morfología bacteriana en una tinción GRAM:
Cocos
Micrococos, aparecen aislados y dispersos tras la división celular. Diplococos, aparecen por pares. Estreptococos, tienden a unirse formando cadenas. Estafilococos, aparecen en grupos irregulares, a veces de gran tamaño
Formaesférica: se llama Coco
División a lo largo del mismo plano, formando cadenas cortas
División a lo largo de 2 planos diferentes: Tétradas
División a lo largo de 3 planos
2 cocos juntos: Diplococos
4 - 20 en cadenas: Estreptococos
Regularmente: Sarcinas
Irregularmente: Estafilococos
Bacilos
Grandes variaciones morfológicas: fusiformes, estreptobacilos, cocobacilos
Forma de vara: sellaman Bacilos
Dos bacilos juntos: Diplobacilos
Cadenas de bacilos: Estreptobacilos
Empalizadas, Bacilos lado con lado o en figuras en X, V o Y
Espirales (Treponemas, Borrelias...)
Forma espiral rígida se llama: Espirilo
Si la espiral es flexible y ondulada se llama: Espiroqueta
Utilizamos el término Pleomorfismo para referirnos a la adopción de diferentes formas en una misma especie.RODAMINA-AURAMINA
Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias poseen afinidad para los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante contra un fondo verdoso. El permanganato de potasio, empleado como contraste, evita la fluorescencia inespecífica. Todos los microorganismos ácido-alcohol resistentes,incluyendo los esporozoarios parásitos, se tiñen con estos colorantes.
Un aspecto importante de la coloración rodamina-auramiria es que luego los frotis pueden ser reteñidos con la coloración de Ziehl-Neelsen o Kinyoun directamente sobre la tinción con el fluorocromo, si se elimina antes el aceite de inmersión. De esta forma, los resultados positivos pueden ser confirmados con las coloracionestradicionales, que además permiten la diferenciación morfológica.
NARANJA DE ACRIDINA
El fluorocromo naranja de acridina se une al ácido nucleico ya sea en su forma nativa o desnaturalizada. En algunas preparaciones de naranja de acridina, el color de la fluorescencia puede variar, dependiendo del pH y de la concentración. El naranja de acridina ha sido empleado como colorante vital, que da unafluorescencia verde si el microorganismo está vivo y rojo si está muerto. De todos modos, como el colorante se intercala en el ácido nucleico, el germen viable se inactivará poco tiempo después de la tinción.
El uso de naranja de acridina para detectar la presencia de bacterias en los hemocultivos ha sido ampliamente aceptado. De hecho, una gran cantidad de estudios han demostrado que la tinción dehemocultivos con naranja de acridina es tan sensible como el subcultivo ciego para la detección inicial de hemocultivos positivos.
ZIEHL-NEELSEN (BAAR)
Las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción concolorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistente. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.
Se ha desarrollado una...