magisterio de primaria

SISTEMÁTICA DE TRABAJO EN LA DETERMINACIÓN DE FÁRMACOS Y DROGAS






PRUEBA INICIAL (DE DESPISTAJE) Y PRUEBA DE CONFIRMACIÓN
Los análisis y por tanto la determinación de fármacos y drogas de abuso se llevan a cabo mediante dos pasos o etapas:
1. Prueba inicial o de despistaje:
La finalidad analítica de estas pruebas es la de eliminar los verdaderos negativos y reducir al máximo elnúmero de análisis de segundo nivel, es decir, el de confirmación, debido a que sus pruebas son más sensibles y costosas.
Estas analíticas se conocen también como screening y facilitan la rápida realización de una amplia serie de determinaciones entre las que se incluyen las de drogas d elevado índice de consumo. Permiten una evaluación rápida y fácil de realizar y evitan en gran medida erroresdebidos a la manipulación de los especímenes

2. Prueba de confirmación:
Los métodos de confirmación se emplean para averiguar si los especímenes verdaderos positivos obtenidos en la prueba inicial, lo son de verdad. Deben poseer una sensibilidad adecuada, ser muy específicos y estar basados en principios químicos o físicos diferentes de los utilizados en las pruebas de despistaje.Los inmunoanálisis son los métodos de despistaje más empleados para las drogas de abuso, mientras que los principales métodos de confirmación de un resultado positivo de una prueba de despistaje son la cromatografía de gases y la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Aunque la técnica másadecuada para la confirmación es la cromatografía de gases acoplada con la espectrometría de masas.

TIPOS DE PRUEBAS INICIALES
Los métodos de screening (prueba inicial) son adecuados para la verificación del consumo de estupefacientes, la evaluación del grado de abuso y la identificación de las sustancias consumidas, la comprobación de la eficacia y el seguimiento del tratamiento, la identificaciónde la dosis terapéutica eficaz del sustitutivo de la sustancia estupefaciente consumida y el conocimiento del modo de actuación en caso de emergencia.
Las técnicas de screening se basan en la inmunoquímica y, en concreto, en el principio de competición entre el trazador comercial o preparado en el laboratorio (sustancia estupefaciente marcada) y la sustancia estupefaciente consumida por elindividuo, ambas con capacidad antigénica, por el sitio de unión al anticuerpo específico de estas sustancias. A continuación se explican algunas de ellas:

Inmunoensayo de polarización de fluorescencia (FPIA)
El FPIA combina dos técnicas para crear un único sistema analítico: el enlace competitivo y la polarización fluorescente.

Enlace competitivo

Requiere tres elementos:
- La muestra quecontiene la sustancia que se va a investigar o analito.
-Un reactivo compuesto por moléculas del analito ligadas a fluoresceína (complejo analito-trazador).
- Otro reactivo constituido por anticuerpos dirigidos, específicamente, contra el analito.

Cuando se ponen en contacto la muestra y los reactivos, el analito presente en la muestra compite con el complejo analito-trazador para ocupar lospuntos de unión del anticuerpo.

El resultado de esta competición depende de la concentración relativa del analito, contenido en la muestra, con respecto a la del complejo analito-trazador. De forma que cuanto mayor es la concentración del analito en la muestra mayor cantidad de él se une a los anticuerpos y, por lo tanto, mayor cantidad del complejo analito-trazador queda sin unirse a estos...