Manejo De Equipos De Laboratorio

MANEJO DE EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO

I. OBJETIVO

- Conocer la Teoría y el Empleo del espectrofotómetro e Instrumentos de Laboratorio.
- Medir el grado de Absorbancia de una sustancia..

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Espectrofotómetro

Un espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entrevalores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir lacantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra.
Componentes de un Espectrofotómetro:
Fuente de luz
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientescondiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos.
Monocromador
El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, seusa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente quedirecciona ese haz hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra
Es donde tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni dispersión de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, en base a sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la moléculade fundamental-excitado.
Detector
El detector, es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos:
a) los que responden a fotones;
b) los que responden al calor
Registrador
Convierte el fenómeno físico, en números proporcionales al analito en cuestión.
Fotodetectores
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo

III. MATERIALES Y EQUIPOS

Materiales y Equipos
- Espectrofotómetro con cubetas
- Pipetas de 5mL, 10 mLgraduadas
- Tubos de ensayo de 10 x 100mm
- Probetas
- Gradillas

Reactivos
- Colorante Azul de Metilo- Colorante Azul de Bromofenol
- Agua destilada

IV. PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS

A.- MANEJO DEL ESPECTROFOTÓMETRO

1.- Prenda el instrumento y dejar de 5 a 10 minutos para preparar el equipo.
2.- Gradúe a cero de absorbancia o 100% de tramitancia, usando agua destilada como blanco para calibrar el espectrofotómetro.
3.- Coloque la solución problema en otra cubeto o tubo y reemplazar elblanco de calibración.
4.- Observar el desplazamiento de la escala de medición y anotar la absorbancia correspondiente.

* Realizamos la gráfica de absorbancia en papel milimetrado registrando los datos obtenidos:

Longitud de Onda (λ) | Medida de Absorbancia |
400 nm | 0,056 |
450 nm | 0,089 |
500 nm | 0,124 |
550 nm | 0,171 |
600 nm | 0,170 |
650 nm | 0,139 |
700 nm |...