Manejo De Microorganismos Para Biorremediacion

MANEJO DE CULTIVOS MICROBIANOS EN BIORREMEDIACIÓN

1. OBJETIVOS.
Adiestrar a los estudiantes en las técnicas y operaciones unitarias de aislamiento, identificación y reproducción masiva de microorganismos.
Conocer los principios básicos de formulación de medios de cultivo y pruebas bioquímicas de identificación microbiana.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
1. DEFINICIÓN DE CULTIVO.
Cultivomicrobiano. Se puede definir como un sistema termodinámico complejo donde cada uno de sus componentes guarda un perfecto equilibrio (relación C- N- P, tasa de crecimiento microbiano, tasa de consumo de nutrientes), bajo condiciones controladas.

Sistema dinámico donde la materia viva interactúa con un componente abiótico que presenta alta actividad biológica (nutrientes: C-N-P, en forma deproteínas, hidratos de carbono, lípidos y un componente mineral integrado por Na, K, y microelementos), bajo condiciones controladas, que garantizan un equilibrio en la interacción.
Técnicamente hablando, un cultivo es un sistema artificial desarrollado con una intencionalidad con objetivos específicos, los mismos que pueden ser variados en dependencia del tipo de actividad productiva que la sociedad losemplee.
Naturalmente los microorganismos, se reproducen en forma masiva, sobre todo sustrato que disponga de una fuente de carbono y otros nutrientes esenciales para su metabolismo. La velocidad de crecimiento y su población, dependen de varios factores:

1. Disponibilidad de nutrientes.
2. Factores ambientales externos.
3. Presencia de inhibidores.
4. Competencia
5.Condiciones del microambiente.
6. Propiedades fisiológicas del microorganismo
1. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO.
Los medios de cultivo pueden ser: Generales y selectivos.
Los medios de cultivo generales, se emplean para garantizar el crecimiento masivo de la gran mayoría de microorganismos presentes en una muestra, indistintamente de su morfología y fisiología. Estos cultivos se emplean paraconocer la diversidad microbiana existente en una muestra objeto de estudio.
Medios de cultivo selectivos, son medios especializados cuya composición garantiza el crecimiento de una sola especie de microorganismos, por disponibilidad o ausencia de un cierto componente específico que determina su capacidad metabólica característica.”
2. CARACTERÍSTICAS DE LOS CULTIVOS.
Los medios de cultivo secaracterizan por un conjunto de propiedades entre las que podemos mencionar:
1. Alta asimilación de sus componentes (nutrientes semi digeridos, procesados).
2. Relación de macro y micronutrientes balanceada.
3. Propiedades físico- químicas ideales para garantizar el crecimiento microbiano.(conductividad eléctrica, pH, salinidad, temperatura, consistencia, humedad)
4. Disponibilidadde estimulantes de crecimiento.
5. Pureza y asepsia.
6. Elevado costo
7. Limitada disponibilidad.

3. PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO.
Los medios de cultivo se preparan siguiendo las indicaciones detalladas por el fabricante, las mismas que difieren en relación al tipo de medio y de la casa productora.
A manera de ejemplo citamos el medio de cultivo para bacterias reductoras deFe y Mn:
1. (NH4)2SO4----------1,5g
2. K2HPO4--------------0,05g
3. KCl---------------------0,05g
4. MgSO4.7H2O-------0,05g
5. Ca(NO3)2.4H2O--- 0,01g
6. H20 destilada------- 1000ml.
Después de la esterilización el medio se deja enfriar 2-3 días, para la saturación con CO2 y oxígeno.

Foto No1. Medio sólido en caja petri


Fuente: Programa de investigación,Tratamiento de lodos residuales de AYMESA, 2009. Richard cabrea, Miguel Gualoto.

Foto No2. Medio sólido en tubo de ensayo

Fuente: Programa de investigación, Tratamiento de lodos residuales de AYMESA, 2009. Richard cabrea, Miguel Gualoto.

4. MUESTREO PARA AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
5. SIEMBRA
2. Siembra directa
Se pesan 100g del sustrato contaminado y se disuelven en 1000 ml...