Manejo Y Calibración Del Espectrofotómetro

MANEJO Y CALIBRACIÓN DEL ESPECTROFOTÓMETRO

OBJETIVO

Calibrar el espectrofotómetro de manera adecuada para poder manejarlo correctamente y posteriormente realizar las mediciones indicadas.
FUNDAMENTOS

ESPECTROFOTOMETRÍA
Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda. Cada componente de la solución tiene su patrón deabsorción de luz característico. Comparando la longitud de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra versus soluciones estándar, es posible determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra (solución incógnita).Las ventajas de la espectrofotometría sobre otros métodos analíticos de laboratorio son varias: es rápida, precisa, versátil, fácilde usar y eficiente en costo. Los espectrofotómetros se han mejorado en precisión y versatilidad en los últimos años con los avances de tecnología, y hoy se consideran indispensables en un laboratorio de química analítica.

La espectrofotometría se usa para diversas aplicaciones, como:

•Análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación,•Estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas,
•Detección de niveles de contaminación en aire y agua,
•Y determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.

Tipos de Espectrofotometría
De absorción de infrarrojos, por resonancia magnética, de fluorescencia, emisión atómica, absorción atómica, de masas, de fluorescencia de rayos X.
Todas las sustanciaspueden absorber energía radiante, cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas.
La espectrofotometríaultravioleta-visible utiliza haces de radiación del espectro electromagnético, en el rango UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 700 nm , por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la región ultravioleta y visible del espectro.
Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce también como rango de uv cercano, laespectrofotometría visible solamente usa el rango del campo electromagnético de la luz visible , de 400 a 700 nm.
Además, no está de más mencionar el hecho de que la absorción y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la concentración como de la distancia recorrida.

Espectro electromagnético

Ley de Beer
Declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentración en lasolución.
Ley de Lambert
La cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la distancia recorrida por la luz.
Ley de Bouguer-Beer-Lambert
Una ley muy importante es la ley de Bouguer-Beer-Lambert (también conocida como ley Lambert Bouguer y Beer) la cual es solo una combinación de las citadas anteriormente.
Transmitancia y absorción de las radiaciones
Al hacer pasar una cantidad defotones o de radiaciones, por las leyes mencionadas anteriormente, hay una pérdida que se expresa con la ecuación:
It/Io=T-kdc''
Donde It, es la intensidad de luz que sale de la cubeta y que va a llegar a la celda fotoeléctrica (llamada radiación o intensidad transmitida); y Io que es la que intensidad con la que sale al atravesar la celda (radiación intensidad incidente) y la relación entre ambas(T) es la transmitancia.
En el exponente, el signo negativo se debe a que la energía radiante decrece a medida que el recorrido aumenta.
La ecuación simplificada de la ley de Beer-Lambert
A = ε.d.c
Comprende a la mínima ecuación que relaciona la concentración (c), la absorbancia de la muestra (A), el espesor recorrido por la radiación (d) y el factor de calibración (ε).
La absorción (o...