Manipuladores Microbiologia

PRACTINA No.10
ANALISIS MICROBIOLOGICO A MANIPULADORES


RESUMEN
En la práctica se examino las manos de un estudiante como si fuese un “operario” de alimentos y a la superficie en que los manipularía habitualmente, que fue el mesón del laboratorio, para determinar la presencia de microorganismos en ellos, se realizo una toma de muestras mediantes hisopos que se depositaron en caldo decultivo, y posteriormente este caldo en agar VRBG y PDA, a los cuales se les realizo conteo de UFC/manipulador después de haberlos dejado en reposo tres días, en incubadora y a temperatura ambiente respectivamente.

INTRODUCCION

Se denomina manipulador a toda persona (operario) que trabaje en la elaboración, producción, procesamiento, almacenamiento, distribución, transporte, expendio de alimentoso materias primas para estos mismos.
En una planta procesadora de alimentos, el manipulador desempeña un papel importante en la fabricación de los productos que allí se elaboren, ya que se puede convertir en una fuente de contaminación. Las manos albergan una carga microbiana normal, y es donde residen los microorganismos saprofitos, además de los implementos que se utilicen en el proceso.METODOLOGIA

Para realizar las muestras al manipulador y superficie se utilizo un hisopo estéril, el cual se mojo con caldo nutritivo, este se paso por toda la superficie de una de las manos del “operario”, este mismo procedimiento se llevo a cabo para la prueba en superficie, el hisopo se paso varias veces por los 10 cm2 delimitados por una plantilla estéril.

Los hisopos con los que setomaron las muestras se depositaron en los tubos con caldo nutritivo, de estos tubos se tomaron muestras de 1 mL que se sembraron en cajas de petri, a unas se les agrego agar VRB y a otras agar PDA, las cajas con PDA se dejaron en reposo a temperatura ambiente durante tres días, las cajas con PDA se dejaron el mismo tiempo pero en incubadora a 35oC, después de este tiempo se realizo conteo de unidadesformadoras de colonia.



Imagen 1. Cajas de petri con agar PDA (izq) y agar VRB (derc)

RESULTADOS Y DISCUSION

Para las pruebas de manipuladores y crecimiento la toma de muestras se realizo por medio de un hisopo empapado en caldo nutritivo, el cual es usado como medio de enriquecimiento en la detección de bacterias Gram negativas a partir de fármacos tópicos, cosméticos y para pruebasde esterilidad.

Superficie (VRB):

Las cajas de petri que se incubaron con agar nutriente VRB (Violet Red Bile) fundido, el cual hay que tener en cuenta que es un agar selectivo para la demostración y enumeración de bacterias coliformes en especial Escherichia Coli que se manifiestan como colonias rojas. Enterococos y Klebsiellas que se manifiestan como colonias muy pequeñas de colorrosado, y Enterobacteriáceas que aparecen incoloras transparentes no se obtuvo proliferación de bacterias. No se observo ninguna de las anteriores descripciones, lo que indica que no hubo crecimiento microbiano

Manipuladores (VRB):

No se observo ninguna unidad formadora de colonia. Esta prueba es específica para microorganismos que se pueden transferir al alimento debido a contaminación cruzadapor parte del operario que manipula el alimento, un ejemplo de ello son los coliformes totales y fecales, que provenien del tracto gastrointestinal, específicamente de la región anal. La no presencia de microorganismos nos indica la asepsia del manipulador.

Imagen 2. Cajas de petri con agar VRB, muestras de las pruebas manipuladores y superficie

Superficie (PDA)

Las cajas de petricorrespondientes a la prueba de superficie, se dejaron a temperatura ambiente durante poco mas de 48 horas, y las cuales contenían agar PDA (Agar Papa Dextrosa), no se noto crecimiento de hongos, de levaduras ni se observaron colonias de bacterias, a pesar de ser el agar PDA un medio de cultivo y enumeración, de levaduras y mohos a partir de alimentos y otros materiales. Los carbohidratos y la infusión...