Manjar blanco

1. TITULO: Cromatografía en columna
2. ASPECTOS TEORICOS:
La cromatografía es la técnica que separa una mezcla de solutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se establece al ser arrastrados por una fase móvil (liquida o gaseosa) a través de un lecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser sólida o líquida.
El término decromatografía, ya que se ha aplicado ese nombre a varios sistemas y técnicas. Sin embargo, todos esos métodos tienen en común el uso de una fase estacionaria y una fase móvil.

Tipos de cromatografía

Si es un sólido, cabe distinguir entre:

Cromatografía de adsorción: El sólido adsorbe al componente que inicialmente estaba en fase móvil (liquida o gaseosa) (Fuerzas de Van dar Waals)

Cromatografíade cambio iónico: el sólido es un cambiador de iones (fuerzas electrostáticas)
Si es un líquido que se encuentra soportado en un sólido inerte, se trata de la Cromatografía de partición. El soluto se reparte entra la fase móvil (liquido o gas) y la fase estacionaria.
Según la técnica empleada y la naturaleza de las fases se clasifican en:
Cromatografía en columna
Cromatografía en papelCromatografía sobre papel
Cromatografía en fase gaseosa
Cromatografía de alta performance

Cromatografía de Adsorción
La fase estacionaria es un sólido. La separación se produce por etapas sucesivas adsorción/desorción
• La sílica gel y la alúmina son las fases estacionarias más usadas
• Tanto el soluto como el solvente son atraídos a los sitios polares de la FE
• Si los solutos tienengrados de atracción diferentes por la FE, se produce la separación

Cromatografía de Partición
La separación se da por la partición del soluto entre dos fases líquidas (solubilidad relativa)

• Se aproxima mucho a la Cromatografía en Contracorriente
• Las sustancias más retenidas tienen mayor afinidad (solubilidad) por la fase estacionaria, que por la fase móvil.
• La separación de lassustancias se da por diferencias en esta solubilidad relativa

Cromatografía de Intercambio Iónico
La FE tiene una superficie cargada iónicamente, con cargas iónicas opuestas a las de los eluentes

PRINCIPALES TECNICAS CROMATOGRAFICAS

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

Se emplea para la separación de mezclas o purificación de sustancias a escala preparativa. Como fase estacionaria se usa, generalmente,gel de sílice o alúmina dentro de una columna. La elección del disolvente es crucial para una buena separación. Dicho disolvente pasa a través de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicación de presión (cromatografía flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de ésta un poco de algodón o lana de vidrio, para evitarque la sílica o la alúmina queden retenidas en la columna y que el disolvente se engrasada hasta el nivel del soporte. A continuación se introduce la muestra por la parte superior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogiéndose por lo general en tubos de ensayo.
Una columna de cromatografía es un tubo de vidrio relleno con una sustancia sólida de propiedades
Adsorbentesconstituida por pequeñas partículas: gel de sílice y alúmina son las más usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografía como la fase estacionaria. A través de la columna se hará pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyente y/o fase móvil.
La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequeña cantidad de disolvente y se coloca sobre el adsorbente, enla parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo. A continuación se pasa un flujo de eluyente a través de la columna. Los compuestos constituyentes de la mezcla son arrastrados por el eluyente a su paso, haciéndoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo, no todos los compuestos avanzan a la misma velocidad, y esta es precisamente la clave de la cromatografía. Algunos...