Manual De Laboratorio Clinico

Glucosa
Método GOD -PAD
Prueba enzimática colorimétrica para Glucosa por Método con Desproteinización

Enzima: Glucosa oxidasa
Método
* La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa.
* El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4- amino- fenazona produciendo un complejo rojo- violeta usando laquimioneimina como indicador
Principio de la reacción
* Glucosa+ O2 + H20 ácido glucónico + H2O2
* H2O2 + 4-aminofenazona + fenol quinoneimina + 4 H2O2

Preparación de los reactivos
* DEPR Y RGT están listos para usar se diluye1 + 10 con agua destilada
Estabilidad de los reactivos
* Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidadcuando se almacenan de 2 a 8 oC
* Una vez abiertos, debe evitarse la contaminación
* RGT es estable por 2 semanas de 15 a 25 oC
Muestras
* Sangre total, suero, plasma.
* La glucosa es estable por 5 días de 20 a 25 oC, si la desproteinización y la centrifugación de la sangre total se realizainmediatamentedespués de la toma de muestra de sangre
* La glucosa es estable por 24 horasde 2 a 8 oC si el suero o plasma es preparado dentro de los 30 minutos después de la toma de la muestra de sangre
Ensayo
* Longitud de onda :500 nm, Hg 546 nm
* Paso de Luz : 1cm
* Temperatura: 20 a 25 oC o 37oC
* Medición: Frente a un blanco de reactivo
* Se requiere sólo un blanco de reactivo por serie

Caracteristicas de las Pruebas
* Linearidad
* La prueba eslineal hasta concentraciones de glucosa de 700 mg/dl o 38,85 mmol/. Si la concentración de glucosa de la muestra está sobre este límite, se debe diluir el sobrenadante libre de proteínas 1+1 con solución desproteinizante, repetir la determinación. Multiplicar el resultado por 2
Valores Normales
* Sangre total(en ayunas) 70- 100 mg/dl o 3,9-5,6 mmol/l
* Suero, Plasma (en ayunas) 75-115mg/dlo 4,2 -6,4 mmol/l
Valores De Referencia
* 75- 115 mg/dl
* Control de Calidad
* Pueden ser empleados todos los sueros control con valores de gucosa determinados por este método.
* Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal HUMATROL o nuestro suero de origen humano SERODOS como control de calidad
Automatización
* Proposiciones para la aplicación de losreactivos sobre analizadores están disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la aplicación en su propia responsabilidad
Notes
* Los sueros ictéricos interfieren en la prueba y no pueden ser usados como muestras.
* Los trigliceridos hasta 2500 mg/dl, la hemoglobina hasta 500 mg/dl y el ácido ascórbico hasta 20 mg/dl no interfieren en la prueba
LA Glucosa Oxidasa es unaenzima que cataliza la oxidación de la Glucosa formando así el peróxido de hidrogeno y D-glucono-d-lactona . El peróxido de hidrógeno se cuantifica vía la reacción de peroxidasa donde el oxígeno se transfiere del peróxido de hidrógeno a un aceptador cromático produciendo un tinte de quinoneimina. La intensidad del color del tinte es directamente proporcional a la concentración de la glucosa en lamuestra del suero
La glucosa que circula en la sangre se reabsorbe casi en su totalidad en los túbulos renales, y en condiciones normales se excreta una cantidad muy pequeña, no detectable con los métodos habituales para dosificarla en la orina, de 130 mg/dl en 24 horas.
Según la Asociación Americana de Diabetes. Los resultados de la prueba de glucosa en ayunas son suficientes para diagnosticar ladiabetes mellitus .En cambio, la OMS(organización mundial de la salud) recomienda basar el diagnostico en la glicemia obtenida 2 horas después de una carga oral de 75 g de glucosa

PRUEBA DE EMBARAZO EN PLACA PARA LA DETECCIÓN DE GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA (HCG) EN ORINA O SUERO HUMANO.
PRINCIPIO
Es una prueba inmunocromatografica de un paso.
La muestra(orina o suero) migra a través...