Manual de laboratorio

MANUAL DE LABORATORIO DE NUTRICION ANIMAL PhD. Francisco I. Juárez Lagunes MC. Maribel Montero Lagunes

INTRODUCCION Los forrajes son una importante fuente de alimento en la nutrición de los hervíboros, y son el principal componente en las dietas de los bovinos en las regiones tropicales, como Veracruz por ejemplo. Su composición cambia significativamente de acuerdo a su estado vegetativo. Estopuede ser explicado por un alto contenido de carbohidratos celulósicos presentes en los forrajes, asociado con lignificación y factores secundarios, los cuales influencian la disponibilidad de otras sustancias de la pared celular (Van Soest y Robertson, 1985). Este problema ocurre en gran medida en los forrajes tropicales, debido a que ellos se caracterizan por contenidos altos de lignina. Elsistema proximal de análisis de alimentos se desarrolló en el siglo antepasado con el objetivo de predecir la disponibilidad de la energía y la proteína de los alimentos. Recientemente, un nuevo método fue desarrollado (The Cornell Net Carbohydrate and Protein System – CNCPS), en el cual las fracciones de carbohidratos y proteinas se subdividen, considerando la composición química, característicasfísicas, degradación ruminal, y digestión posruminal. El CNCPS considera la dinámica de la fermentación ruminal y la potencial pérdida de nitrógeno como amonia en la evaluación de los alimentos (Sniffen y col., 1992). Muy poca información se tiene acerca de la composición nutricional de los forrajes tropicales para ser utilizada en el modelo CNCPS para evaluar dietas para bovinos. Este manual tieneel objetivo de describir las técnicas de evaluación de los carbohidratos y las proteínas en el laboratorio en adición a los análisis que regularmente se realizan.

ANALISIS PROXIMAL DETERMINACION DE EXTRACTO ETEREO O GRASA CRUDA Los aceites y grasas presente en la muestra seca se extraen para cuantificarse con un disolvente orgánico, éter etílico o petróleo. Por este método también se extraenotras sustancias solubles en estos disolventes como ceras y pigmentos. En el caso de forrajes verdes ricos en clorofila y pigmentos el método descrito sobreestima el contenido de grasa. Este método cuantifica las sustancias extraíbles en éter etílico. Reactivos: Eter etílico anhidro, éter de petróleo o hexano. Procedimiento: Extraer en un aparato soxhlet o goldfisch aproximadamente 2 gr. De muestraseca con éter dietílico anhidro en un dedal de papel filtro que permita el paso rápido del disolvente. El tiempo de extracción puede variar desde 4 hrs a velocidad de condensación de 5 a 6 gotas por segundo, hasta 16 horas, de 2 a 3 gotas por segundo. Recuperar el éter y evaporar el éter residual sobre baño maría en lugar bien ventilado, secar el residuo a 100° durante 30 minutos, enfriar y pesar.Notas: Grandes cantidades de componentes solubles en agua como carbohidratos, urea, ácido láctico, glicerina y otros pueden interferir con la extracción de grasa; si ése es el caso extraer 2 gr. De muestra sobre un papel filtro en un embudo con cinco porciones de 20 ml de agua antes de secar la muestra para determinar el extracto etéreo. Si va a determinar la grasa a heces o dietas que contienesales de Ca o Mg probablemente haya formaciones de jabones, los cuales no son solubles en los mismos disolventes, en tal caso es necesario hacer una hidrólisis ácida de la

muestra antes de la extracción. Debido a que la hidrólisis ácida extare también fosfolípidos, glucolípidos y lipopotreínas se podría hacer una primera extracción luego de hidrolizar y volver a extraer. Muestras ricas en grasaen ocasiones requieren una extracción antes del secado y una segunda extracción después. La asociación europea de producción animal (Van Es y Van-der Meer, 1980) sugiere el uso de éter de petróleo o hexano, arguyendo que el éter etílico extrae sustancias aparte de la grasa como azúcares y pigmentos, además por razones de seguridad del laboratorio ya que el punto de ebullición del éter etílico...