Manual De Microbiologia General

UNIVERSIDAD VERACRUZANAFACULTAD DE BIOANALISIS |
MANUAL DE MEDIOS DE CULTIVO |
MICROBIOLOGIA GENERAL |
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19/11/2010 |

Nombre del medio: Agar sangre

Composición: La Base de Agar Sangre generalmente es suplementada con sangre de carnero, conejo o caballo al 5-10%. La infusión de músculo de corazón y la peptona de caseína proporcionan lafuente de nitrógeno, carbono, aminoácidos y proteínas. El extracto de levadura provee vitaminas y aminoácidos esenciales. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es usado como agente solidificante. Este medio está relativamente libre de azúcares reductores los cuales interfieren en las reacciones hemolíticas de estreptococos. El patrón de las reacciones hemolíticas puede variardependiendo del tipo de sangre utilizada.

Método de preparación:
Infusión de Músculo de Corazón 2.0
Extracto de Levadura 5.0
Cloruro de Sodio 5.0
Agar Bactereologico 15.0
Digerido Pancreático de Caseína 13.0
Bacteriológico 15.0
pH 7.3 ± 0.2
Método:
Suspender 40 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante unminuto. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 libras de presión). Enfriar a una temperatura entre 45-50 ºC y añadir, de preferencia, sangre de carnero estéril y desfibrinada al 5%.
Homogeneizar y vaciar en placas Petri estériles.

Fundamento:
La Base de Agar Sangre es un medio también conocido como BAB por sus siglas en inglés.
En 1919 Brown experimentó con formulaciones de agar sangre paraobservar el efecto hemolítico de las
colonias de neumococcos. La Base de Agar Sangre es una modificación del medio “Hormone” de Huntoon con una ligera composición ácida.

Utilidad:
Para aislar cultivar y estudiar reacciones hemolíticas de una amplia variedad de microorganismos fastidiosos patógenos. utilizado para el aislamiento y cultivo de una amplia variedad de microorganismos, adicionado desangre es útil para el cultivo de microorganismos fastidiosos.

Reacciones:
Los estreptococos hemolíticos presentan colonias translúcidas u opacas, grises, pequeñas y mucoides con una zona de hemólisis. Otros organismos que pueden producir hemólisis incluyen a Listeria, varias conirebacterias, estafilococcos hemolíticos, E. coli y Pseudomonas.
Las colonias de neumococcos aparecen planas, lisas,translúcidas, grisáceas y algunas veces mucoides rodeadas por una pequeña zona verdosa de alfa hemólisis,
Las colonias de estafilococcos tienen una apariencia opaca, de color blanco a amarillo y rodeadas de una zona clara por la beta hemólisis.

Nombre del medio: Agar Gelosa Chocolate

Composición: Suplementada con hemoglobina al 2% que provee la hemina(Factor X) requerida para el crecimiento de Haemophilus y mejorar el desarrollo de Neisseria, así como suplementos que proveen glutamina, cocarboxilasa, levadura, glutamina, coenzimas, hemina, vitaminas, aminoácidos, dextrosa y otros factores de crecimiento, todos ellos necesarios para el mejor desarrollo de Haemophilus y Neisseria.

Método de preparación:
Mezcla de Peptonas 15.0
FosfatoDipotásico 4.0
Almidón de Maíz 1.0
Fosfato Monopotásico 1.0
Cloruro de Sodio 5.0
Agar Bacteriológico 10.0
pH 7.2 ± 0.2

Método:
Suspender 7.2 g del medio en 100 mL de agua purificada para obtener una base de doble concentración, mezclar y dejar reposar durante 5 minutos, calentar con agitación frecuente hasta completar la disolución del polvo y hervir durante un minuto. Por otro lado,preparar 100 mL de una solución de hemoglobina al 2% adicionando gradualmente agua a 2 g de hemoglobina seca para obtener una solución uniforme. Esterilizar ambas soluciones en autoclave a 121 °C durante 15 minutos. Enfriar las soluciones a una temperatura de 45-50 °C, mezclar. Homogenizar y vaciar en placas Petri estériles.

Fundamento:
En 1945 Jhonston describió un medio adecuado para observar...