Manual de microbiologia

Manual Básico de Microbiología • Recomendaciones generales

Recomendaciones generales de empleo para los medios de cultivo deshidratados y preparados CULTIMED
Medios de cultivo deshidratados
Preparación Por regla general los ingredientes de los medios de cultivo CULTIMED se disuelven por agitación y calentando ligeramente en agua destilada. Los medios que contienen agente gelificante sesuelen hervir durante 1 minuto para conseguir su disolución. Aunque en la mayor parte de los medios hay que calentar, se deben evitar sobrecalentamientos innecesarios. Algunos medios presentan turbidez inevitable o precipitados, por ejemplo la Base de Caldo Tetrationato. Al distribuir el medio debe hacerse de forma uniforme, para que el precipitado quede bien repartido. Posteriormente a la disoluciónse procede a la esterilización del medio. En algunos casos existen componentes lábiles que no pueden añadirse en el medio de cultivo deshidratado y que será necesario su esterilización por separado y una posterior incorporación de forma aséptica para obtener el medio completo. El pH de los medios de cultivo se ajusta durante su fabricación a los valores descritos en cada uno de ellos. Sin embargo,la calidad del agua que se utiliza en su hidratación, la utilización de medios no recientes, etc., pueden modificar este parámetro por lo que es aconsejable verificarlo y reajustarlo si fuera necesario. En algunos casos se puede ajustar el pH después de la esterilización de forma aséptica y utilizando soluciones ácidas (Ácido Clorhídrico) o básicas (Sodio Hidróxido) estériles. En los mediossólidos la medida se hace a 45-50ºC (el agar todavía no ha gelificado) mientras que en los líquidos se hace a temperatura ambiente. Los medios ácidos (pH 105 > 103 – 105 > 10 – 10
3 3 3 5 5 5

Recuperación % ≥30 ≥30 ≥30 ≥30 ≥30

> 10 – 10 > 10 – 10

Presentaciones Código 413744.1208 413744.1210 413744.0914 453744.0922 493744.0922 433744.0922 Símbolos de envases b Envase de polietileno G Cubo depolipropileno con asa v Caja Envase 100 g 500 g 5 kg 20 placas de Ø 90 mm 10 frascos x 90 ml 30 placas de contacto Presentación b b G v v v Unidad caja estándar 6 6 Precio

S. aureus ATCC 25923. Incubación a 35-37ºC / 18-72 horas.

Manual Básico de Microbiología • Medios de cultivo

Bilis-Rojo Neutro-Violeta Cristal con Glucosa Agar (Ph.Eur.)
Se emplea para el recuento de Enterobacterias enproductos lácteos, cárnicos y otros alimentos. Sinónimos VRBG, Agar

(VRBG),

Fundamento Por la presencia simultánea de violeta cristal y sales biliares se asegura en gran parte la inhibición de la flora acompañante. La degradación de la glucosa a ácido se pone de manifiesto por el cambio de color del indicador. La presencia de halo en estas colonias corresponde a un precipitado biliar. Lamayoría de organismos que presentan estas características son Enterobacterias, sin embargo no es completamente específico, por ejemplo, las Aeromonas se comportan de forma similar. Fórmula (por litro) Composición (g/l): Sales Biliares ...................................................... 1,5 g Rojo Neutro .................................................... 0,03 g Extracto de Levadura......................................... 3,0 g Sodio Cloruro ................................................... 5,0 g pH final: 7,4 ±0,2

Violeta Cristal ................................................. 0,002 g D(+)-Glucosa ..................................................10,0 g Digerido Pancreático de Caseína ........................ 7,0 g Agar............................................................... 15,0 g

Preparación Suspender 41,5 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir durante 1 minuto. Dejar enfriar a 45ºC y emplear de inmediato. Se puede esterilizar a 118ºC durante 15 minutos. NO SOBRECALENTAR NI REFUNDIR EL MEDIO. Modo de empleo Transferir 1 ml de la muestra a analizar y 1 ml de sus sucesivas diluciones a tantas placas como correspondan. Con el...